U2OS-FLUC

经验分享｜生物发光成像标记物选择

生物发光是一种依赖于酶和底物的相互作用来产生光的化学过程。所需的酶被称为荧光素酶，底物因荧光素酶的类型而不同（如荧光素）。 常用荧光素酶信息表： 其中最有代表性的是来自萤火虫体内（Firefly）和海肾（Renilla）体内的两类萤光素酶，分别命名为萤火虫荧光素酶（FLuc）和海肾荧光素酶（RLuc），同时近年来研究得较多的是来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（GLuc）。 萤火虫荧光素酶（FLuc）作为最通用和最常见的报告基因，该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性，可用于原核和真核细胞。FLuc

基因递送的多面手：慢病毒载体

基因 Akaluc 用于追踪胶质瘤的体内生长、侵袭和转移过程[3] 使用非侵入性生物发光成像（BLI）对肿瘤生长进行纵向追踪是研究体内癌症模型的关键方法。Akaluciferase（Akaluc）是一种新的 BLI 系统，其信号强度高于标准的萤火虫荧光素酶（Fluc）。本文设计了一种慢病毒载体，用于在胶质瘤细胞系中表达 Akaluc，追踪胶质瘤的体内扩张过程。   实验设计和主要研究结果： Akaluc 和 Fluc 报告基因的设计和灵敏度比较。用表达 Venus-Akaluc 或 Venus-Fluc

利用共聚焦显微镜实现 DNA 修复蛋白可视化

激光诱导 DNA 损伤后 U2OS 细胞的活细胞成像 双链 DNA 断裂是对 DNA 损伤最有害的形式之一。损伤之后，细胞中的 DNA 损伤反应（DDR）通路被触发，诱导 DDR 因子募集到断裂位点，并启动细胞周期检查点信号传导和 DNA 修复活性的调控。精准的信号转导和断裂位点修复对于细胞的生存和防止致癌突变至关重要。因此，了解 DNA 修复过程中的相关机制尤为关键。在此应用中，我们使用 FV3000 共聚焦显微镜，研究了 U2OS 细胞（人骨肉瘤上皮细胞）DNA 修复蛋白在激光诱导损伤