Seebio® 辣根过氧化物酶（HRP）

辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）是一种糖蛋白，从辣根（Horseradish）中提取。HRP分子量为44,000，等电点为pI 3～9，是一个球状分子，被血红素铁分成远端区和近端区。血红素铁与HRP共价连接。HRP的纯度通常可通过A403与A280的比值（RZ值）来检测。然而，不同的同工酶在相同纯度下会有不同的RZ值。适合HRP酶催化的pH值因供氢体不同而稍有差异，但多在pH 5左右。已知NaN3，cyanide，L-胱氨酸，重铬酸盐，亚乙基硫月尿，羟基胺，硫化物，钒酸，对氨基-苯甲酸等能够抑制HRP活性，Cd²⁺，Co²⁺，Cu²⁺，Fe³⁺，Mn²⁺，Ni²⁺和Pb²⁺离子具有酶活抑制作用。HRP在组织化学染色和诊断分析中被广泛用作报告酶。在有机合成中，HRP被用于聚合反应、氧化脱氢反应和磺化氧化反应。HRP还被用作电化学生物传感器，在生物修复系统中用于降解合成染料等。

1、将HRP溶解于含有8mM高石典酸钠的0.1M碳酸钠中，浓度为1mg/mL；

2、室温放置2小时，使HRP被充分氧化；

3、按HRP:IgG=1:7(mg/mg)的比例加入过量的IgG，然后加入HRP和IgG总质量1/6的干燥Sephadex，以破坏未反应的高石典酸盐；

4、室温孵育3小时；

5、过滤去除Sephadex，保留溶液；

6、加入l/20 体积的新鲜Sodium borohydride溶液（5 mg/ml，溶解在0.1 mM NaOH中），半小时后重复加入3/20 体积的新鲜Sodium borohydride溶液，保持1小时。

7、用50%硫酸铵沉淀HRP-IgG偶联物，未交联的自由IgG用Con A亲和层析（PBS-NaC1平衡）去除，结合在柱上的HRP-IgG用0.01 M α-甲基D-吡喃甘露糖苷洗脱。

参考文献：1. Anal Biochem. 1984 Feb;136(2):451-7;

参考文献：2. Arch   Virol. 1982;74(4):277-91. 

在25 ℃，pH7.0时，每分钟催化转化一个微摩尔过氧化氢的酶量。

冻干粉，无添加成分。

项目	指标
来源	辣根
分子量	44kDa
活性	≥250U/mg
RZ值	2.5-4.0
外观	褐色结晶性冻干粉状

低温运输，2-8℃保存，有效期≥1年。

1、本产品限科学研究使用。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。