2-甲基-3氧-2,3-二氢-1氢-异吲哚-4-羧酸;142

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

加三蒸水定容至500ml，使用前加PMSF至1%。 1.2 蛋白提取（此步在冰上进行） 组织称重，切碎，以每克组织加3ml RIPA裂解液，冰上以匀浆器匀浆，转到小离心管中，冰上放置40分钟，使其蛋白质充分裂解。4?C ，10000rpm，离心10min，取上清，转入小tube管中，-20 ℃贮存备用。 1.3 蛋白定量 Bradford 法定蛋白的原理：考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种

分子生物学实验常用试剂配置

。 1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。 1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。 25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20℃。 1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2•6H2O于足量的水中，定容到100ml。 100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基

常用细胞凋亡检测方法（图）

5mg；PBS 10ml，pH7.4, 临用前过滤后，加过氧化氢至0.02%。 8、0.5％甲基绿（pH4.0）：甲基绿0.5g；0.1M乙酸钠100ml。 9、100％丁醇，100％、95％、90％、80％和70％乙醇，二甲苯，10％中性甲醛溶液，乙酸，松香水等。 10、 过氧化物酶标记的抗地高辛抗体（ONCOR） 二、实验步骤 1、标本预处理： （1）石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中，用二甲苯洗两次，每次5min。用无水乙醇洗两次，每次3min。用95％和75％乙醇