甲醇中全氟壬烷磺酸钠;98789-57-2;50μg/ml;

Western 实验步骤

液裂解细胞，用移液器适当吹打使细胞脱落，大瓶贴壁细胞可以先用胰酶洗脱下来后再裂解，裂解方法仿照悬浮细胞处理。 B、 悬浮细胞的处理：先将悬浮细胞置于 EP 管中 3000 rpm 离心 5 min 去掉上清培养基，每 20 μL 体系细胞加 100 μL 裂解液反复吹打至细胞完全破碎。 处理好的样品 12000 rpm 离心 5 min，取上清即为提取的蛋白。置于 4 ℃ 可保存一周，-20℃ 可保存约 2 个月，-80 ℃ 可保存半年。 蛋白浓度的测定：酶标板，酶标仪、离心机、1 mg/mL

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

ul   0ul   其次，将以上浓度的标准溶液依次加入96孔板中，每孔加40ul，制作平行孔。之后，将样品上清液用1×PBS稀释50倍（或100倍），混匀，以每孔40ul加入上述96孔板中，制作平行孔。 根据不同浓度BSA在595 nm的不同的紫外光吸光值，用酶标仪测定样品在595 nm处的吸光值，用excel求出一元线性回归方程（y=kx+b），其中y是吸光值，x是测定的样品上清液的浓度，求出

种子蛋白质系统分析：（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）

溶液，在沸水浴中加热3～4min，冷却后使用。(14)高分子质量标准蛋白溶液包括卵白蛋白（MW=450000）、牛血清白蛋白（662000）、磷酸化酶B （925000）、ß-半乳糖苷酶（1162500）、肌球蛋白重链（2000000） ，配制方法同（13）。　　( 15 ) 25%乙醇。 四、操作步骤 (1)在制板支架上置一专用有机玻璃槽，将固定好的玻璃板下部插入槽内，中部用两个文具夹固定在支架竖板上，在槽内倒入已充分溶化的琼脂，冷凝后封闭胶腔底部。 (2)取50ml烧杯1只，加30