- ￥599
- 源叶
- 中国
- T96448-1ml
- 2025年10月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃（运输条件：冰袋低温运输）
- 英文名：
SR59230A
- 库存：
99
- 供应商：
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号：
174689-39-5
- 规格：
1ml
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文献和实验关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
SDS-PAGE从胶中纯化蛋白质浸提液母液：0.5 mol/L Tris-CI pH 7.91.0 mmol/L EDTA1.5 mol/L NaCL1.0 % SDS上述各取1ml 混匀，加入6 ml 水，混匀，即为10ml 浸提液。回收蛋白方法：1. 使用厚胶，设两个样品孔，一个为蛋白marker，另一为样品。2. 电泳结束后，将Marker和少许样品带切下，进行染色和脱色。剩余样品胶置于4 ℃。3. 根据Marker和被染色的样品带，切下未被染色的胶中蛋白带。4. 称重，研碎，加入3～
或者乙二醇降低极性，这样溶解就会好得多，此外你也直接加2%的PEG这样也降低极性，同时保护你的蛋白，你再做纯化就可以了，我以前遇到这样的蛋白是用10%的乙醇加3-5%的PEG5000，这样的情况下蛋白还是活性回收率很高，我觉得那些表面活性剂能不用还是不用的好，你失去活性你可以监测一下提取，纯化，酶切到底哪里失去了活性，这样更容易解决你的问题。还有注意缓冲液PH值，看看改变它对溶解度有没有影响。蛋白有沉淀那你可以稍微把蛋白的浓度降低点，这也是个办法。 2) 请问楼主有没有合成过配体为FMN的亲和
沉淀，我用0.5%CHAPS助溶可勉强溶解部分，目的蛋白疏水性比较强。既然是疏水性很强你可以加点甘油或者乙二醇降低极性，这样溶解就会好得多，此外你也直接加2%的PEG这样也降低极性，同时保护你的蛋白，你再做纯化就可以了，我以前遇到这样的蛋白是用10%的乙醇加3-5%的PEG5000，这样的情况下蛋白还是活性回收率很高，我觉得那些表面活性剂能不用还是不用的好，你失去活性你可以监测一下提取，纯化，酶切到底哪里失去了活性，这样更容易解决你的问题。还有注意缓冲液PH值，看看改变它对溶解度有没有影响。蛋白
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