- ￥469
- 源叶
- 中国
- S45650-1g
- 2025年10月29日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT
- 英文名：
Fluorene-2-carboxaldehyde
- 库存：
99
- 供应商：
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号：
30084-90-3
- 规格：
1g
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文献和实验3. 预扩增 取3 μl 酶切连接产物，加入75 ng E+A，75 ng M+C引物，15 mmol/L Mg2+，25 mmol/L dNTPs，1 U Tag酶，3 μl 10×PCR缓冲液，加双蒸水补至30 μl。反应参数为：94℃90 s；94℃30 s，56℃1 min，72℃1 min，30循环；72℃10 min。反应结束后，用0.8%琼脂糖凝胶（含EB 0.5 μg/ml）电泳检测扩增产物，取3 μl 产物释稀50倍，用作选择性扩增模板。4. 选择性PCR扩增 取释稀后的产物
出尿素。选择性扩增产物中加入等体积上样缓冲液（98%甲酰胺，10mmol/LEDTA，0.25%二甲苯青，0.25%溴酚蓝）94℃变性5min（PCR仪），结束后迅速置于冰上直到点样。每个泳道加样8μl。一开始用100W恒功率电泳约2分钟，使样品迅速集中到孔底部，再调到60W恒功率电泳，温度保持在43℃左右，至二甲苯青FF至玻璃板2/3处，结束电泳。（六）银染固定液：取100ml冰醋酸到900ml去离子水或双蒸水中。染色液：1g AgNO3 ，1.5ml 37% 甲醛，加去离子水至1L。显色液：30
+A，75ng M+C引物，15mmol/L Mg2+，25mmol/L dNTPs，1U Tag酶，3μl 10×PCR缓冲液，加双蒸水补至30μl。反应参数为：94℃90s；94℃30s，56℃1min，72℃1min，30循环；72℃10min（PE公司PCR仪）。反应结束后，用0.8%琼脂糖凝胶（含EB0。5μg/ml）电泳检测扩增产物（见图①），取3μl产物释稀50倍，用作选择性扩增模板。（四）选择性PCR扩增取释稀后的产物3μl，加入EcoRⅠ选择性引物、MseⅠ选择性引物各75ng，15
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