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文献和实验存于冰箱, 最好为-20℃。多数肽以此方法可以存放几年不变。 肽溶液的保存 溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性pH(pH5-7), -20℃保存的,为避免样品的反复冻融, 最好分成小样存放。一份样品融冻后未用完, 应扔掉,细菌降解有时会成为溶液肽的麻烦, 为克服此,肽应溶于无菌水, 或肽溶液用0.2μ M滤膜过滤。 多肽的重建和操作 多数肽溶于无菌蒸溜水。初次溶解时,要注意使初始浓度比要求浓度大,如果多肽仅有限溶解性, 这便允许加入其它溶解剂或缓冲
。4、从温箱中取出培养瓶,向瓶底轻轻注入含20%CS及PS的DMEM培养液5ml,然后缓缓翻转培养瓶,让培养液慢慢覆盖附于瓶壁上的组织小块,置于37℃温箱内培养。5、一周后取出培养瓶,弃去瓶内培养液,Hank,s液漂洗两次后加相同的培养液5ml继续培养。以后待细胞萌出后,同样方法每周换液两次。(二)传代培养待原代培养细胞生长基本融合成片时即可传代。1、吸出培养瓶内的培养液,Hank,s液漂洗两次,向瓶内加入0.5%的胰蛋白酶溶液少许以覆盖瓶底为度。2、大约1分钟左右,镜下观察细胞胞质回缩,细胞间隙增大时
商品化试剂和培养基均经过严格的质量控制以保证其无菌,但它们在操作过程中可能被污染。请遵循以下指导原则进行无菌操作,避免污染。请始终使用适当的灭菌方法(如高压灭菌器、除菌过滤器)对实验室中配制的任何试剂、培养基或溶液进行灭菌。 无菌操作 请始终用 70% 乙醇擦拭双手和工作区。 将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前,先用 70% 乙醇擦拭其外部。 不要直接从试剂瓶或培养瓶中倾倒培养基和试剂。 使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时,每只移液管只能使用一次,以避免
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