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999
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联硕生物
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100G

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文献和实验,留取沉淀物。加入0.25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙液lml,用吸管吹打成悬液,以17000rpm离心20分钟,将上清吸入另一试管中,留取沉淀物,加入0.1ml 0.25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙溶液混匀成悬液,即得线粒体。 (3)液闪仪我没有用过,不过我觉得提取的线粒体数目应该足够你做(每个心肌细胞中都有>1000个的线粒体)。具体的上样标准我觉得需要查你使用的液闪仪的说明书。 8、问:盐酸乙醇该怎么配置呢? 答:0.5%的溶液应为重量百分比,即100g
菌属和肠杆菌属等均为试验阳性,而沙门菌属、变形杆菌属和普罗威登斯菌属等为阴性。 5.VP试验 (1)原理:测定细菌产生乙酰甲基甲醇的能力。某些细菌如产气肠杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步脱羧形成乙酰甲基甲醇。在碱性条件下,乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰,进而与培养基中的精氨酸等含胍基的物质结合形成红色化合物。即V-P试验阳性。 (2)方法:将待检菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中,35℃孵育24~48h,加入50g/Lα-萘酚(95%乙醇溶液)0.6ml,轻轻振摇试管,然后加0.2
的程序中常规的加入30%~50%甲酰胺(for-mamide)于杂交液中。McConaughy报告,反应液中每增加1%的甲酰胺浓度,Tm值可降低0.72℃。因此,可用调节 盐浓度的办法来调节 Tm。Tm的计算公式在第十九章 有介绍,由公式的列出也表明了它与盐的浓度、探针的长度、甲酰胺的百分比等诸多因素有关。由于盐和甲酰胺浓度的调节 等因素,实际采用的原位杂交的温度在Tm-25℃左右,即比Tm减低25℃,大约在30~60℃之间,根据探针的种类不同,温度略有差异,RNA和cRNA探针一般在37~42℃
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