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999
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联硕生物
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1G

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文献和实验图谱程序来确定蛋白 N 端或内部的序列。2. 材料 ( 1 ) SDS 抽样缓冲液:0.06 mol/L Tris-HCl ( pH 6.8),2% SDS,10% 甘油,5% 巯基乙醇。 ( 2 ) 分离胶用的丙烯酰胺(丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺= 30:0.135):30.00 g 丙烯酰胺,0.135 g 甲叉双丙烯酰胺(BIS ) 。用 MQ ( Millipore 公司的 MilliQ 净水设备处理过的水)水定容至 100 ml,黑暗中保存(可使用棕色
了一半。刚开始的我不敢向导师提出任何要求,就这样按着老师给的方案(方案是两年前师姐用色氨酸和苏氨酸合成二肽的实验。)开始了,实验方案如下: (1)合成N-Boc-L-Tryptophan色氨酸的合成 在150ml单口瓶中加入2.04g的L-色氨酸,80ml的10%的三乙胺甲醇混合溶液,搅拌溶解。随后加入叔丁氧碳酸酐4.35g,控制温度在55℃以下反应30min。反应完后,有机相减压蒸馏,蒸出大部分的三乙胺甲醇混合溶液。剩余的溶液在冰水浴下用10ml的盐酸酸化至pH=2,再用
值至8.9.阴极缓冲液为0.1 mol?L-1 的Tris, 0.1 mol?L-1的Tricine和0.01 g?L-1的SDS溶液,其pH值约为8.25. 胶缓冲液为3.0 mol?L-1的Tris和 0.03 g?L-1的SDS,用HCl调pH值至8.4. 称取48 g丙烯酰胺和1.5 g N,N′-甲叉双丙烯酰胺溶于100 mL纯水中,溶解混匀后经4号滤纸过滤即得到495 g?L-1 T,30 g?kg-1 C的贮存液;称取46.5 g丙烯酰胺和3.0 g N,N
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