BP897，B9308-5MG

文献速递｜Nature Communications：TRIM25 通过相分离调控抗病毒应激颗粒形成及先天免疫应答

蛋白标记组鉴定到 TRIM25 是受 poly(I:C) 处理富集的 SG 核心蛋白。 (A) G3BP1 BioID 方法与基于 TMT 的定量蛋白质组学相结合的示意图；(B) 如 (A) 中所确定的，由 poly(I:C) 处理诱导的 SGs 核心蛋白列表。 随后，研究人员为了探究 poly(I:C) 处理导致的 TRIM25 被招募到 SG 中是否有特异性，使用各种应激诱导剂，系统地处理了过表达 GFP-TRIM25 的 HeLa 细胞：RNA 病毒入侵（仙台病毒，SeV）、外源

交联染色质免疫共沉淀（X-ChIP）实验设计

洗脱液，接着按照3.2b进行）2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品

PCR 不必“摸条件”

μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500