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RT
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见标签
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999
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
25ML

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文献和实验mol/L MgCl2。BufferⅣ(pH8.0):10mmol/L Tris・Cl,1mmol/L EDTA。 (三)、操作流程 1、使用地高辛标记的核酸探针进行石蜡切片的RNA原位杂交第一天 1) 二甲苯于37℃脱蜡2次,每次15分钟; 2) 无水乙醇浸泡2次,每次3分钟; 3) 95%乙醇浸泡2次,每次3分钟; 4) PBS清洗3分钟; 5) 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟; 6) PBS清洗10分钟; 7) 加入胃蛋白酶25ul/ml,37℃
; (4) PBS清洗3分钟; (5) 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟; (6) PBS清洗10分钟; (7) 加入胃蛋白酶25ul/ml,37℃孵育15分钟; (8) PBS清洗2次,每次3分钟; (9) 0.2N的HCl孵育30分钟; (10)PBS清洗2次,每次3分钟; (11)0.25%无水乙酸和0.1M三乙醇胺孵育10分钟; (12)PBS清洗2次,每次
2 (pH8.0),0.05% SDS先将 Tris.HCl 和 EDTA 混合后高压,然后加 10%SDS 至所需浓度,此缓冲液配制后不可高压。(5)3M NaAc (pH5.2)(6)DEPC (焦碳酸二乙酯,sodium acid pyrophophate) 处理水:0.1% DEPC 双蒸水,37 ℃ 摇动温育至少 12 h,然后 15 磅高压 15 min。【实验方法与步骤】(1)将 0.5~1 g 的 Oligo(dT) 纤维素悬于 0.1M NaCl 溶液中,然后用 0.5~1 mL 装柱
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