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- 文献和实验
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RT
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见标签
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999
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
25G

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文献和实验1.原理 蛋白质中的酪氨酸与色氨酸和Folin酚试剂中的磷钨酸、磷钼酸作用后,在碱性条件下不稳定,被还原成蓝色的化合物(钼蓝)。因此通过比色即可测知标本中的蛋白含量。该法的优点是操作简单、灵敏度高,且不受溶液中脂多糖的干扰。 2.试剂 试剂甲: A液:Na2 CO3 10.00g NaOH 2.00g 酒石酸钾钠(或钾盐钠盐)0.25g 混合、溶于500ml蒸馏水中。 B液:CuSO4 .5H2O 0.5g H2O 100.00ml 用前将A液50份与B液1份混合即为试剂甲
1.25g 酪蛋白,用0.04mol/L 氢氧化钠溶液(20mL)溶解,再用0.02mol/LpH7.5磷酸缓冲液 定容到250mL。 四、操作步骤 (一)酪氨酸标准曲线的制作 取6支试管(标号0,1~5),按顺序分别加入0.00,0.20,0.40,0.60,0.80和1.00mL 标准酪氨酸溶液,再用水补足到1.00mL,摇匀后各加入0.55mol/L 碳酸钠5.0mL,摇匀。依次加入Folin—酚试剂1.00mL,摇匀并计时,于30℃水浴锅中保温15min
mL 溶解后,蒸馏水定容至250mL。 8. 酪蛋白溶液(0.5%):称取1.25g 酪蛋白,用0.04mol/L 氢氧化钠溶液(20mL)溶解,再用0.02mol/LpH7.5磷酸缓冲液定容到250mL。 四、操作步骤 (一)酪氨酸标准曲线的制作 取6支 试管 (标号0,1~5),按顺序分别加入0.00,0.20,0.40,0.60,0.80和1.00mL 标准酪氨酸溶液,再用水补足到1.00mL,摇匀后各加入0.55mol/L 碳酸钠5.0mL,摇匀
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