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联硕生物
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5ML

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文献和实验Divide into two 15 ml c/f tubes--5 ml each. Invert for additional 5 min. Solution should be pink and will contain thread-like material. Spin at 4°C, 4000 rpm for 20 min to remove insoluble material. All spins done in fixed angle rotor
%、且大部分无分化的状态时,吸出培养基。 3、向 hPSCs 中加入 0.5 mM EDTA 洗涤细胞一次。 4、吸去 EDTA 溶液,每孔加入 0.6ml Accutase,并将培养皿放置在 37℃ 解离约 3-5min,直到所有的细胞变圆。 5、向每个孔中加入 5ml 的 hPSCs 培养基,并用 0.1% 台盼蓝进行染色计数。 6、将所有细胞转移至 15ml 离心管中,室温下 300g 离心 3min,收集沉淀细胞。6 孔板中每孔接种 2×105 个细胞,加入预热的 3ml hPSCs 培养
Elabscience|肺泡巨噬细胞研究必看:LPS诱导急性肺炎模型制备与检测全攻略
)。 (5)推注完成后停留5-10 s,可轻按摩小鼠胸部,促进生理盐水与肺泡充分接触,随后轻柔回抽灌洗液。 (注:肺泡灌洗液自然回收率较低,通常为50%-70%,可重复灌洗3-4次;全程需将收集的灌洗液置于冰上保存,避免样本变质影响后续检测。) 3. 流式检测 1)将收集好的肺泡灌洗液300 × g离心3-5 min,离心完后去掉上清,留下白色沉淀。 (2)加入Cell Staining Buffer重悬,调整细胞密度至1×107/mL。 (3)取100 μL细胞悬液,加入CD16/32封闭抗体,轻轻
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