1,12-二溴十二烷,3344-70-5，174866-25

树突细胞的分离-用小鼠骨髓前体细胞培养树突细胞

瘤上清（ATCC号TIB120）、B7-2/CD86的杂交瘤上清（Pharmingen）、DEC-205的抗体（ATCC号HB290） 10. 解剖用品 11. 无菌纱布垫 12. 100mm培养皿（如Falcon） 13. 3ml注射器25G，5/8in（1.58cm）针头 14. 9in（23cm）巴氏吸管（填充棉花并高压灭菌） 15. Nytex滤器（3-40/26；Tetko）

【共享】mRNA的一些技术

组织和细胞RNA的制备 一、 组织和细胞总RNA提取： 异硫氰酸胍法 （一）试剂准备 1．CSB缓冲液：42mM柠檬酸钠；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸钠)；0.2 mM β-巯基乙醇。 2．变性液：异硫氰酸胍（终浓度 4 M）25g、CSB缓冲液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助溶。4℃保存备用。 3．2 M乙酸钠：pH 4.0。 4．异丙醇 5．无水乙醇、70%乙醇 6．酚：氯仿：异戊醇（25：24

组织和细胞RNA的制备

酶-EDTA消化后，PBS重悬细胞并转移至10ml离心管中；悬浮培养细胞可直接转移离心管；离心：500g×5min；PBS洗涤2次。弃上清，置冰浴。加预冷变性液2 ml，充分摇动，使细胞裂解完全。以下操作均在冰浴中进行。 （２）组织：取1-2g组织（新鲜或-70℃及液氮中保存的组织均可）置组织匀浆器中，加入预冷的变性液12ml，在冰浴中充分匀浆。 2． 加2 M乙酸钠(pH 4.0)0.2ml，混合后将溶液转移至5ml离心管中。 3． 加酚：氯仿：异戊醇2.2ml，颠倒混合用力振荡