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RT
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见标签
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999
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
10G

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文献和实验,10 min 收集细胞,然后换为新的不含外泌体的培养基或者无血清替代培养基继续培养 24-48 小时,根据细胞的生长速度确定收取上清时间; 3)收集细胞上清,300 g,4°C,离心 10 min,小心收集上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片; 4)3000 g,4°C,再次离心 15 min,确保将细胞或者细胞碎片去除干净; 5)取上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片,合并相同的细胞培养液上清样品,装入无菌容器,可在 4°C 短期保存(1-2 天),长期保存可冻存于-80°C。建议细胞上清分离后尽快
。 4、培养细胞时,如何去除血清来源的外泌体? 多数情况下,细胞在体外培养时需要血清,而血清中一般都含有外泌体,为避免血清对细胞外泌体的污染,可采用以下两种方法: 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体; 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清(或者外泌体专用培养基)在什么时候使用? 使用无外泌体血清培养基:细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞汇合度在60% - 70% 时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基,继续
,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
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