培养基瓶倒置转液支架

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜，暴露胎鼠，剪开颅骨，取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中，体视显微镜下剥离脑膜,分离胎鼠纹状体，仔细剥离血管及脑膜，将收集到的纹状体在D-hanks液中漂洗两次，置于盛有4℃D-hanks液的器皿中，用虹膜剪将组织剪碎,加入0.125℅的胰酶消化(37℃，15min)，期间每隔5min震荡一次。500转离心5min, 弃上清，D-hanks液清洗两次，将沉淀细胞重悬于增殖培养基中，培养基成分：DMEM/F12（1：1），2% B27

细胞培养从头学——入门篇

计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。 2. 培养室的设备 液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。 3. 必须放在无菌间的设备 离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱（孵育培养物）、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱（放置serum和培养用液）。 二、无菌操作 （一）无菌室的灭菌 1.定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地

兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定

正中切口，迅速切取膀胱组织。超净台内依次庆大霉素溶液（浓度为100单位/毫升）、生理盐水及D-Hanks液中浸泡洗涤5分钟，然后放入D-Hanks液中除去黏膜、黏膜下及浆膜层。肌肉剪成肉糜后0.1%胶原酶（Ⅱ型2mg/ml）溶液40过夜消化（约10-12小时）。然后加0.25%胰蛋白酶370消化30分钟，消化液变混浊呈絮状提示消化良好。用100目细胞筛过滤该絮状液，混悬液离心（1000转/分，离心半径13cm）5分钟，沉淀的细胞移入培养皿，加入含10%胎牛血清的DMEM，置于50ml/L CO2