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羊驼纳米抗体文库构建服务

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  • 2025年10月11日
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    卡梅德科技致力于纳米抗体库构建与纳米抗体文库筛选服务已有9年多的时间,并拥有一支经验丰富的技术团队。基于我公司成熟的抗体发现服务平台,每年都有数百个羊驼纳米抗体文库构建服务成功交付。卡梅德科技建立了一个完善的、成熟的纳米抗体展示技术服务平台。基于噬菌体展示技术,卡梅德科技可以提供包括抗原设计、羊驼免疫、羊驼纳米抗体文库构建与筛选、活性功能验证等主要实验环节,并为全球的科学家提供高特异性和高亲和力的羊驼纳米抗体文库构建服务。

    羊驼是骆驼科的成员,包括美洲驼(Llama)以及我们熟悉的羊驼(Alpaca)。除常规IgG外,驼科动物还产生一种功能性单链抗体,或称为单域抗体,该抗体能够与抗原结合,有时称为VHH抗体。这些抗体仅由重链组成,缺乏轻链和功能性CH1和CH4结构域。这些所谓的重链抗体正被用于开发单域抗体。这些抗体的单结构域性质提供了独特的优势,使其在生物技术应用中脱颖而出。

    羊驼VHH抗体(单域抗体)的优点:(1)在高温和pH下的稳定性;(2) VHH可以识别通常不被常规抗体识别的抗原位点;(3)它们的小分子片段有助于快速组织渗透和标记应用,包括跨越血脑屏障;(4)用于大规模生产节约成本的替代品。

    卡梅德科技使用M13噬菌体的pIII蛋白进行VHH抗体(纳米抗体)的表面展示。我们的科学家构建了带有Flag和6×His标签双标签的噬菌体载体,并制备了具有10^8转染效率的TG1和XL1 Blue宿主细胞,经过2-3次转染和扩增,可以为客户提供高质量的羊驼纳米抗体展示文库,其足够的库容量为10^8-10^9,包装容量为10^13-10^16/ml。通过抗原限制压力进行多轮纳米抗体文库筛选,可获得多达20-30株高亲和力噬菌体菌株。最后通过简单的IPTG诱导,可以在1-2周内获得大量抗体表达产物,以满足客户的研究需求,例如FACS(流式检测)和细胞活性测试。

     

    羊驼纳米抗体库构建流程:

    产品细节图片1

     

    羊驼纳米抗体库构建服务内容:

    步骤 服务内容 周期
    羊驼免疫 * 一只健康的成年羊驼(28-36月大)免疫5-7次
    * ELISA效价测定
    * 抗血清采集
    8-10周
    cDNA制备(客户可以提供细胞) * 总RNA提取
    * 高保真RT-PCR制备cDNA
    1个工作日
    VHH纳米抗体库的构建 * 引物设计与合成
    * 以cDNA为模板,PCR扩增重链抗体基因可变区
    * 噬粒构建与转化:酶切、连接噬菌粒载体,电击转化TG1宿主菌,构建抗体库
    * 鉴定:随机挑选20-50个克隆,PCR鉴定、测序、分析抗体序列
    3-4周
    VHH纳米抗体文库筛选(3轮) * 抗原极限施压法进行3轮筛选
    * 鉴定:随机挑选96个克隆,ELISA效价测定
    * 10-15个阳性克隆表达制备VHH抗体上清
    4-5周

    交付

     

     

    --羊驼VHH纳米抗体库2ml,>1⨯10^13/ml噬菌体颗粒,有效库容量>10^8

    --表达10-15个阳性克隆以制备VHH抗体上清液

    --实验报告:实验步骤和序列测定信息和比对结果

    --原始数据:可根据客户要求提供完整实验记录原始数据

     

     

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    [1] Muyldermans S. Single domain camel antibodies: current status. J. Biotechnol. 2001 Jun;74(4):277-302.

    [2] Goldman ER, Anderson GP, Zabetakis D, et al. Llama-derived single domain antibodies specific for Abrus agglutinin. Toxins (Basel). 2011 Nov;3(11):1405-19.

    [3] Jones ML, Alfaleh MA, Kumble S, et al. Targeting membrane proteins for antibody discovery using phage display. Sci. Rep. 2016 May 18;6:26240.

    相关实验
    • 纳米抗体开发及案例分享

      l a m a ),提供更高抗体多样性;5)超高品质:插入正确率 100%,序列正确率 97%,随机选取 200 个克隆测序,均无重复序列。6)普健生物也可提供噬菌体展示纳米抗体文库构建及淘选一站式技术服务,服务内容及周期如下: 案例展示普健生物构建了千亿级纳米抗体 VHH 文库,淘选了针对新冠 NTD domain 的纳米抗体,获得了 9 条 VHH 序列,并采用哺乳系统进行了 9 条 VHH-Fc 的重组表达,9 条 VHH-Fc 序列的表达量均较高。      

    • 兔单抗开发及案例分享

      ,鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。目前的抗体药物大多来源于小鼠或噬菌体展示库。2019 年 3 月,首个骆驼源纳米抗体 Cablivi 获得 FDA 批准上市。2019 年 10 月,迎来首个兔单抗药物 Beovu,是抗体药物发展历程中的一个里程碑。临床使用的大多数治疗用抗体均需进行体外亲和力成熟,以提高抗体的亲和力。这一过程耗时长(8-12 个月),最终亲和力在 10-9mol/L。而兔单抗不需经体外亲和力成熟,就能达到 10-11 至 10-13mol/L。另外,兔

    • 通过羊驼抗体治疗帕金森病的潜力

      单分子荧光显微镜来详细研究α-突触核蛋白的瞬态和毒性低聚物,从而解决了低聚物表征的实验挑战。骆驼派生纳米抗体在我们目前发表在《BMC生物学》上的研究中,我们将单分子荧光技术与多种生物物理检测相结合,以了解一类新型治疗分子,即纳米体对α-突触核蛋白聚合的影响。从羊驼中提取的纳米体只包含传统抗体的一小部分(单个域),但具有完全的抗原结合能力,最近在许多由蛋白质功能障碍引起的疾病中显示了作为结构工具和治疗剂的巨大潜力。我们发现与α-突触核蛋白分子结合的纳米体能够减缓其聚集反应。此外,我们的单分子实验结果表明,纳米体能使α

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