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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -80°C.
- 克隆性:
Recombinant
- 标记物:
Unconjugated
- 适应物种:
human
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB, ELISA
- 靶点:
Phospho-CD117/c-Kit (Tyr703)
- 抗体英文名:
Phospho-CD117/c-Kit (Tyr703) Recombinant monoclonal antibody, PBS Only
- 抗体名:
Phospho-CD117/c-Kit (Tyr703) Recombinant monoclonal antibody, PBS Only
- 规格:
100ug
产品信息
83925-1-PBS targets Phospho-CD117/c-Kit (Tyr703) in WB, ELISA applications and shows reactivity with human samples.
| 经测试应用 | WB, ELISA |
| 经测试反应性 | human |
| 免疫原 |
fusion protein |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类别 | Recombinant |
| 产品类型 | Antibody |
| 全称 | v-kit Hardy-Zuckerman 4 feline sarcoma viral oncogene homolog |
| 别名 | CD117, KIT, EC:2.7.10.1, c-Kit, C Kit |
| 计算分子量 | 976 aa, 110 kDa |
| 观测分子量 | 140-160 kDa |
| GenBank蛋白编号 | BC071593 |
| 基因名称 | CD117 |
| Gene ID (NCBI) | 3815 |
| 偶联类型 | Unconjugated |
| 形式 | Liquid |
| 纯化方式 | Protein A purfication |
| UNIPROT ID | P10721 |
| 储存缓冲液 | PBS only, pH 7.3. |
| 储存条件 | Store at -80°C. The product is shipped with ice packs. Upon receipt, store it immediately at -80°C |
背景介绍
Kit is composed of five N-glycosylated immunoglobulin domains in the N-terminal extracellular portion that bind SCF, a transmembrane domain, and the carboxy-terminal intracellular tyrosine kinase domain. The binding of SCF autophosphorylates Kit on specific tyrosine residues (Tyr), such as Tyr568/570, Tyr703, Tyr721, and Tyr936. Kit then binds to other cytoplasmic enzymes, such as PI3K and Src kinases, and this complex activates downstream molecules. This activates the Akt-Bad pathway and the Ras-Mek-Erk cascade, which regulate gene expression and cytoskeletal structures, resulting in cell proliferation and survival. (PMID: 28403213)
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文献和实验1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
中。5. 用无菌 PBS 将上述锥形试管填满(至 50 mL)。介绍样品制备。6. 洗涤。在室温、低速制动条件下,以 300 X g 离心分离试管 10 分钟。7. 裂解红细胞(BD 产品目录号:555899,10 x 溶液。在蒸馏水中使用 1 x 溶液。室温孵育 15 分钟。)8. 将 1x106 PBMC 重悬于 20 μL 染色缓冲液中(PBS 含有 5% 正常人血清)。9. 加入抗体:CD117-BV421 (c-kit)、CD7-BV510、CD57- BV605、CD8-BV650
液,加入6ml DMEM完全培养基,37℃孵育过夜,再换液。 7、培养过程中观察细胞生长情况。约2周后可观察到细胞病变(CPE)出现(如用pAdTrack-CMV质粒,由于含GFP,可观察到绿色荧光)。四、重组病毒鉴定 1、转导10-14d后,收集细胞沉淀,加入2ml灭菌的PBS混悬,冻融细胞,离心后收集上清保存于-80℃。 2、取30-50% 步骤1中上清,感染50-70%饱和度的25cm2方瓶中293细胞。2-3d后出现明显细胞病变。 3、感染后3-5d,当1/3-1/2细胞漂浮时
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