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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
Recombinant human UBC12 protein
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -20°C. Stable for one year after shipment.
- 克隆性:
Recombinant
- 标记物:
Unconjugated
- 适应物种:
human
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB, FC (Intra), ELISA
- 靶点:
UBC12
- 抗体英文名:
UBC12 Recombinant monoclonal antibody
- 抗体名:
UBC12 Recombinant monoclonal antibody
- 规格:
50ul/100ul/150ul
| 规格: | 50ul | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100ul | 产品价格: | ¥2480.0 |
| 规格: | 150ul | 产品价格: | ¥3280.0 |
经过测试的应用
| Positive WB detected in | HEK-293 cells, L02 cells, SMMC-7721 cells, A549 cells, HT-1080 cells |
| Positive FC (Intra) detected in | HEK-293 cells |
推荐稀释比
| 应用 | 推荐稀释比 |
|---|---|
| Western Blot (WB) | WB : 1:500-1:1000 |
| Flow Cytometry (FC) (INTRA) | FC (INTRA) : 0.25 ug per 10^6 cells in a 100 µl suspension |
| It is recommended that this reagent should be titrated in each testing system to obtain optimal results. | |
| Sample-dependent, Check data in validation data gallery. | |
产品信息
83628-1-RR targets UBC12 in WB, FC (Intra), ELISA applications and shows reactivity with human samples.
| 经测试应用 | WB, FC (Intra), ELISA |
| 经测试反应性 | human |
| 免疫原 |
CatNo: Ag5984 Product name: Recombinant human UBC12 protein Source: e coli.-derived, PET28a Tag: 6*His Domain: 1-183 aa of BC058924 Sequence: MIKLFSLKQQKKEEESAGGTKGSSKKASAAQLRIQKDINELNLPKTCDISFSDPDDLLNFKLVICPDEGFYKSGKFVFSFKVGQGYPHDPPKVKCETMVYHPNIDLEGNVCLNILREDWKPVLTINSIIYGLQYLFLEPNPEDPLNKEAAEVLQNNRRLFEQNVQRSMRGGYIGSTYFERCLK |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类别 | Recombinant |
| 产品类型 | Antibody |
| 全称 | ubiquitin-conjugating enzyme E2M (UBC12 homolog, yeast) |
| 别名 | UBE2M, NEDD8 protein ligase, NEDD8 conjugating enzyme Ubc12, NEDD8 carrier protein, hUbc12 |
| 计算分子量 | 21 kDa |
| 观测分子量 | 17-20 kDa |
| GenBank蛋白编号 | BC058924 |
| 基因名称 | UBC12 |
| Gene ID (NCBI) | 9040 |
| RRID | AB_3671241 |
| 偶联类型 | Unconjugated |
| 形式 | Liquid |
| 纯化方式 | Protein A purfication |
| UNIPROT ID | P61081 |
| 储存缓冲液 | PBS with 0.02% sodium azide and 50% glycerol, pH 7.3. |
| 储存条件 | Store at -20°C. Stable for one year after shipment. Aliquoting is unnecessary for -20oC storage. |
背景介绍
UBE2M (Ubiquitin-conjugating enzyme E2 M), also called UBC12, accepts the ubiquitin-like protein NEDD8 from the UBA3-NAE1 E1 complex and catalyzes its covalent attachment to other proteins. The specific interaction between UBE2M and the E3 ubiquitin ligase RBX1, but not RBX2, suggests that the RBX1-UBE2M complex neddylates specific target proteins, such as CUL1, CUL2, CUL3 and CUL4. Involved in cell proliferation (PMID: 10207026; 15361859).
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文献和实验消化PC12是个错误观点,其一针对悬浮PC12,胰酶消化的效果不好证实,其二,我养的PC12,性质贴壁,用100%胰酶消化1小时,愣是没动静,细胞甚至不变圆。最后用力拍打才可以,但代价是细胞损伤非常大,不好恢复。其三,ATCC上明确建议用细胞刮勺刮取PC12,目前我改用刮勺,细胞传代后状态要比用胰酶消化的好很多。 4.再者关于1640和DMEM的问题,我个人观点,二者的主要区别在于DMEM含糖量高,神经细胞都喜欢这,另外1640含一些离子,是防止培养的细胞贴壁。1640一开始主要应用于单克隆抗体
至总体积 10 ul混合后置 14~16 ℃ 水浴 6~12 h。【注意事项】1)通常 DNA 插入片段与载体 DNA 的摩尔比为 3:1 或 2:1,需根据 DNA 分子量计算,而不取决于浓度;2)平齐末端连接时,插入片段的量要远远大于载体 DNA 的量,可以为 5:1 或更多,即使这样,连接效率仍然很低。3)有时 DNA 一端是粘端,另一端是平端,这种连接与双酶切粘端连接相似;4)不匹配末端需要连接时,首先要将末端处理成平端,然后再进行连接反应。六、重组质粒的转化【实验目的】学习和掌握感受
。 (2)受体细胞: 受体细胞一般要求是具有限制重组缺陷性,而且应与所转化的载体DNA性质相匹配,如pBR322转化大肠杆菌JM83株,其转化率不高于10 3 /mg DNA,但若转化ED8767株,则可获得106 /mg DNA的转化率。 (3)转化操作: 受体细胞的预处理或感受态细胞的制备对转化率影响最大。对于Ca2 诱导的完整细胞转化而言,菌龄、CaCl2 处理时间、感受态细胞的保存期以及热脉冲时间均是很重要的因素,其中感受态细胞通常在12-24小时内转化率最高,之后转化率急剧
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