精子活体染色液(伊红-苯胺黑法)

原代细胞染色技术

一．台盼蓝染色 （1）制备单个细胞悬液，并作适当稀释（106 细胞/ml)。（2）染色：取9滴细胞悬液移入小试管中，加一滴0.4%台盼蓝溶液，混匀。（3）计数：在3分钟内，用血球计数板分别计数活细胞和死细胞。（4）镜下观察，死细胞被染成蓝色，而活细胞拒染。（5）根据下式求细胞活力: 二．伊红Y染色 （1）制备1×106 -5×106 细胞／ml的细胞悬液。（2）取0.1ml细胞悬液加0.1ml伊红Y染液混合。（3）用计数板镜下计数活、死细胞数。（4）镜下观察，着红色的为死细胞。按公式计算细胞

精液的涂片检查

涂片检查 精液化后充分混匀制成压滴片，筛检有无精子及精子能否运动。若未查到精子，尚须制备浓缩标本离心法复检。如仍查不到精子，则可判定为无精子症；若仅见少量精子，则称为精子缺乏；若查到的精子全部不运动，则可能为死精子症，但须经体外活体染色检查方能确定。 涂片检查也是检查输精管结扎效果的常规方法。一般于术后经5-6次射精，原贮于附睾和精囊内的精子已排净。通常于术后第六周开始检查。每周1-2次。若连续三次查不到精子则可认为手术成功。否则说明手术失败。医学教育|网搜集整理

流式细胞术的原理

待测样品(如细胞、染色体、精子或细菌等)经荧光染料染色后制成样品悬液，在一定压力下通过壳液包围的进样管而进入流动室，排成单列的细胞，由流动室的喷嘴喷出而成为细胞液流，并与入射激光束相交。细胞被激发而产生荧光，由放在与入射的激光束和细胞液流成 90°处的光学系统收集之。光学系统中的阻断滤片用于阻挡激发光；二色分光镜及另一些阻断滤片则用于选择荧光波长。荧光检测器为光电倍增管。散射光检测器是光电二极管，用以收集前向散射光。小角度前向散射与细胞大小有关。整个仪器用多道脉冲高度分析器处理荧光脉冲信号和光