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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海蒂科生物
- 检测范围:
ELISA
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
ELISA
- 标记物:
用于测定血清、血浆、组织、尿液、及相关液体等样本
- 样本:
用于测定血清、血浆、组织、尿液、及相关液体等样本
- 规格:
48T/96T
【详细描述】:
中文名称:人胆固醇细胞膜(cholesterol)ELISA试剂盒
英文名称:Human cholesterol ELISA Kit
货号:AL-H12000
规格:48T/96T
包装:T25培养瓶
品牌:ALWS
储存温度::-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)
有效期:6个月
产品供应商:上海慧颖生物科技有限公司
1-2个工作日发货,提供免费代测服务,收到标本起一周内提供原始数据和最终数据
ELISA各种样本收集、处理、保存方法
1.血清标本收集、处理、保存方法:
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,全血标本室温放置1-2h或4℃过夜,然后4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
2.血浆标本收集、处理、保存方法:
根据样本要求选择EDTA或肝素钠或枸缘酸钠作为抗凝剂,用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,室温混合20min左右,然后4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清即为血浆。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
3.尿液标本收集、处理、保存方法:
用干净容器收集尿液,4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
4.唾液标本收集、处理、保存方法:
用干净离心管收集唾液,4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
5.细胞标本收集、处理、保存方法:
(1)细胞培养上清
取细胞培养上清到干净离心管中,4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
(2)细胞裂解液
收集细胞培养液,4℃、3000rpm/min离心20min,弃去上清,用预冷的PBS(0.01M,PH7.4)洗涤三次。加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通过反复冻融,使细胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min离心20min,除去细胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
6.植物标本收集、处理、保存方法:
取适量大小组织块(一般0.2-0.5g),用预冷的PBS缓冲液(0.01M,PH7.4)漂洗三次,滤纸拭干水分。准确称重,放入匀浆管中,加入4倍体积的匀浆介质(0.05mol/LTris-HCl,pH7.4PBS缓冲液)于匀浆管中,冰水浴条件下,剪碎组织块,手工匀浆或机器匀浆,制成匀浆液。4℃、10000rpm/min离心20min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
7.粪便标本收集、处理、保存方法:
采集时用干净的竹签挑取粪便样本到离心管中,向离心管中加入适量PBS缓冲液(0.01M,PH7.4),搅拌均匀。然后4℃、10000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
8.组织标本收集、处理、保存方法:
将组织样本用PBS缓冲液(0.01M,PH7.4)冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。将组织块称重,记录后剪碎(碎块尽量小)。将组织按一定的比例(通常组织重量:PBS体积=1:9)加入预冷的PBS缓冲液(临用前加入蛋白酶抑制剂)中匀浆,匀浆时置于冰上。吸取匀浆液到离心管中,4℃、10000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
人胆固醇细胞膜(cholesterol)ELISA试剂盒
1.ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
试剂盒通常能够在短时间内完成检测,提高试验效率,并且具有高敏感性,能够检测到非常低的浓度目标物质。此外,试剂盒具有良好的特异性,能够区分目标物质与非目标物质,减少误报结果的可能性。经过严格的质量控制和验证,试剂盒能够提供精确、可靠的检测结果,具有广泛的线性范围和良好的重复性。
具体来说,试剂盒的优点包括:
高效性:能够在短时间内完成检测,提高试验效率。
敏感性:能够检测到非常低的浓度目标物质。
特异性:具有良好的特异性,能够区分目标物质与其他类似物质。
准确性:经过严格的质量控制和验证,提供精确、可靠的检测结果。
重复性:具有良好的重复性,确保实验结果的稳定性。
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文献和实验在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的变化,而此阶段Propidium Iodide(PI)不能通过细胞膜。细胞坏死时,虽然也会发生磷脂酰丝氨酸外翻,但此时细胞膜的通透性明显
胆固醇存在于真核细胞膜中。胆固醇分子由三部分组成: 极性的头部、非极性的类固醇环结构和一个非极性的碳氢尾部。胆固醇的分子较其他膜脂要小, 双亲媒性也较低。胆固醇的亲水头部朝向膜的外侧,疏水的尾部埋在脂双层的中央。胆固醇分子是扁平和环状的,对磷脂的脂肪酸尾部的运动具有干扰作用,所以胆固醇对调节膜的流动性、加强膜的稳定性有重要作用。 动物细胞膜胆固醇的含量较高,有的占膜脂的50%,大多数植物细胞和细菌细胞质膜中没有胆固醇,酵母细胞膜中是麦角固醇。
中间代谢产物);(2)从β-羟-β甲基戊二酸丢失CO2 形成异戊二烯单位(5C中间代谢产物);(3)6个异戊二烯单位缩合生成鲨烯(30C-中间代谢物);(4)鲨烯通过成环反应转变成羊毛脂固C-醇(30C中间代谢物);(5)羊毛脂固醇转变成胆固醇藽-(27C化合物)。胆固醇除作为细胞膜及血浆脂蛋白的重要组分外,还是许多重要类固醇如胆汁酸、肾上腺皮质激素、雌性激素、雄性激素、维生素D3 等的前体。生物体内许多生理活性物质如维生素A、E及K,胡萝卜素,橡胶,叶绿素的植醇侧链,多种芳香油的主要成分及萜类
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