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- B150
- 2026年01月08日
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【产品概述】
LAMP 是常见的等温扩增技术，使用 LAMP 特异性引物（用户自己提供）和链置换聚合酶快速检测目标核酸。本试剂盒包含优化的2×Bst IsoAmp buffer、Bst Ⅱ DNA 聚合酶、LAMP 荧光染料（50×）。Bst Ⅱ DNA 聚合酶基于 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I，大片段（Bst DNA聚合酶，大片段）改造而成。Bst Ⅱ DNA 聚合酶具有 5´→3´ 的聚合酶活性和强链置换活性，但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。和野生型 Bst DNA 聚合酶，大片段相比，该酶可有效提高扩增速度、产量和热稳定性等。本试剂盒提供荧光染料，可用于实时定量荧光检测。
| 组分 | B150A | B150B |
| Bst Ⅱ DNA Polymerase (8 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
| 2×Bst IsoAmp buffer | 0.65 mL | 3.5 mL |
| LAMP 荧光染料（50×） | 25 μL | 125 μL |
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文献和实验%3d5&f=top&n=10&p=1 1. 优缺点介绍： LAMP方法优点：灵敏度高（比传统的PCR方法高2～5个数量级）；反应时间短（30～60min就能完成反应）；临床使用不需要特殊的仪器（试剂盒研发阶段推荐用实时浑浊仪）；操作简单（不论是DNA还是RNA，检测步骤都是需将反应液、酶和模板混合于PCR管中，置于水浴锅或恒温箱中63℃左右保温30～60min，肉眼观察结果）。 LAMP方法缺点：灵敏度高，一旦开盖容易形成气溶胶污染，加上目前国内大多数实验室不能严格分区
释放酶活；一类是抗体法修饰的热启动酶，如 Champagne Taq ，预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间，方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢？如果实验对保真度的需求不高，那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍，可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段，对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
合成延伸形成茎环状结构。该结构是LAMP基因扩增循环的起始结构。第2阶段是扩增循环阶段。以茎环状结构为模板，FIP与茎环的F2c区结合。开始链置换合成，解离出的单链核酸上也会形成环状结构。迅速以3’末端的B1区段为起点，以自身为模板。进行DNA合成延伸及链置换．形成长短不一的2条新茎环状结构的DNA，BIP引物上的B2与其杂交。启动新一轮扩增。且产物DNA长度增加一倍。在反应体系中添加2条环状引物LF和LB，它们也分别与茎环状结构结合启动链置换合成，周而复始。扩增的最后产物是具有不同个数茎环结构、不同
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