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- 文献和实验
- 技术资料
- 检测范围:
0.16-10 ng/mL
- 检测方法:
Sandwich
- 灵敏度:
0.056 ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1960.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2800.0 |
小鼠D类清道夫受体1(SCARD1)酶联免疫吸附检测试剂盒适合聚焦信号传导、分子机制与差异表达研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,用于定量检测样本中 SCARD1 水平变化,帮助开展分组比较、表达差异分析与机制验证。核心优势是采用 Sandwich ELISA 方案,单次实验约 3.5 小时、每孔样本量 100 μL,兼顾常规批量检测效率与结果对比需求。适用样本包括 组织匀浆、cell lysates及其他生物液体,检测范围 0.16-10 ng/mL,灵敏度 0.056 ng/mL。
基础信息
| 英文名称 | Mouse SCARD1(Scavenger Receptor Class D Member 1) ELISA Kit |
|---|---|
| 相关别称 | CD68; GP110; Macrosialin; Macrophage Antigen CD68 |
| 货号 | ELK8443 |
| 品牌 | ELK Biotechnology 科鹿生物 |
| 规格 | 48T / 96T |
| 检测方法 | Sandwich |
| 适用样本 | 组织匀浆、cell lysates及其他生物液体 |
| 检测范围 | 0.16-10 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.056 ng/mL |
| 标准品 | 10 ng/mL |
| 研究领域 | 信号传导、CD 与粘附分子、感染免疫学 |
试剂盒组成
| 组分 | 48T | 96T | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| 酶标板(可拆)(Pre-coated Microplate) | 6 条 × 8 孔 | 12 条 × 8 孔 | 4°C/-20°C |
| 冻干标准品(Standard (lyophilized)) | 1 | 2 | 4°C/-20°C |
| 标准品&样品稀释液(Standard/Sample Diluent Buffer) | 10 mL | 20 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩生物素化抗体(100×)(Biotinylated Antibody (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4°C/-20°C |
| 生物素化抗体稀释液(Biotinylated Antibody Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩HRP酶结合物(100×)(Streptavidin-HRP (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4°C/-20°C |
| 酶结合物稀释液(HRP Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩洗涤液(25×)(Wash Buffer (25×)) | 10 mL | 20 mL | 4°C/-20°C |
| 显色底物溶液(TMB)(TMB Substrate Solution) | 6 mL | 10 mL | 4°C/-20°C(避光) |
| 反应终止液(Stop Reagent) | 3 mL | 6 mL | 4°C/-20°C |
| 封板覆膜(Plate Covers) | 1 | 2 | 常温 |
| 产品说明书(Instruction Manual) | 1份 | 1份 | 常温 |
保存条件
试剂盒拆封后可 4°C 保存 1 周,如果 1 周内未用完,请将剩余酶标板,冻干标准品,浓缩生物素化抗体,浓缩 HRP 酶结合物放置在-20°C 保存,其他试剂4°C 保存,并在6 个月内用完。
若试剂盒未拆封:4°C(短时间存放,6 个月内有效);-20°C(长时间存放,1 年内有效);避免反复冻融,过期后请勿使用。
如果试剂盒整盒保存在-20°C,请在实验前一天晚上将试剂盒放置在4°C。
操作流程
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|
检测原理
小鼠D类清道夫受体1(SCARD1)酶联免疫吸附检测试剂盒采用夹心法原理。将特异性抗小鼠 SCARD1抗体包被于96孔微孔板中,向微孔中分别加入小鼠 SCARD1标准品或样本,使标准品中的小鼠 SCARD1蛋白或样本中的小鼠 SCARD1蛋白与固相于微孔板上的抗小鼠 SCARD1抗体结合,然后加入生物素化抗小鼠 SCARD1抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记链亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠 SCARD1蛋白呈正相关。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值),通过绘制标准曲线计算出样品浓度。
性能验证数据
标准曲线
| Concentration (ng/mL) | OD | Corrected OD |
|---|---|---|
| 10.00 | 2.043 | 1.940 |
| 5.00 | 1.509 | 1.406 |
| 2.50 | 1.123 | 1.020 |
| 1.25 | 0.806 | 0.703 |
| 0.63 | 0.498 | 0.395 |
| 0.32 | 0.388 | 0.285 |
| 0.16 | 0.199 | 0.096 |
| 0.00 | 0.103 | 0.000 |

精密度
板内精密度(测定内的精密度): CV% < 8%
三个已知浓度的样品分别在1个酶标板上测试20次,以评估分析板内精密度。
板间精密度(测定板间间精密度): CV% < 10%
三个已知浓度的样品分别在3个不同的酶标板上测试40次,以评估分析板间的精密度。
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的小鼠 SCARD1, 做回收率实验,得出回收率范围和平均回收率
| 样本类型 | 回收率范围 | 平均回收率 |
|---|---|---|
| 血清(n=5) | 86-99% | 92% |
| EDTA 血浆(n=5) | 82-95% | 88% |
| Heparin 血浆(n=5) | 80-95% | 87% |
线性
将添加有小鼠 SCARD1的样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围
| 样本类型 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
|---|---|---|---|---|
| 血清(n=5) | 89-99% | 83-99% | 98-105% | 96-101% |
| EDTA 血浆(n=5) | 87-96% | 86-95% | 91-103% | 87-93% |
| Heparin 血浆(n=5) | 82-94% | 85-97% | 91-102% | 81-90% |
常见问题
Q:这款 SCARD1 ELISA 试剂盒更适合哪些研究场景?
A:小鼠D类清道夫受体1(SCARD1)酶联免疫吸附检测试剂盒聚焦信号传导、分子机制与差异表达研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,可用于样本中 SCARD1 的定量比较、分组筛查和机制验证。结合其适用样本 组织匀浆、cell lysates及其他生物液体,适合常规科研检测和阶段性课题验证。
Q:48T 和 96T 规格应该怎么选,更适合哪种采购场景?
A:如果当前以预实验、小批量验证或样本量较少的项目为主,可优先选择 48T;如果需要进行多批次分组比较、重复孔较多或计划连续检测,48T / 96T 中的 96T 规格更适合提高通量并减少补货频率。
Q:如果暂时不确定样本浓度,这款试剂盒是否仍然适合使用?
A:可以先结合本产品 0.16-10 ng/mL 的检测范围和 0.056 ng/mL 的灵敏度进行预判断。若样本可能高于上限,建议先做梯度稀释后上样;若目标属于低丰度表达,这款试剂盒也适合做前期筛查和分组定量。
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文献和实验-甲醛溶液(1;1);或-20℃甲醇。 k、聚苯乙烯微孔板:40孔、96孔、或条孔;硬板或软板均可使用。 l、酶联免疫阅读仪;或光镜。 m、吸管、加样器及水浴箱、离心机等。 ②可溶性抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA) a、纯化抗原用包被液稀释至1-20ug/ml。 b、以50-100ul/孔量加入酶标板孔中,置4℃过夜或37℃吸附2小时。 c、弃去孔内的液体,同时用洗涤液洗3次,每次3-5分钟,拍干。 d、每孔加200ul封闭液4℃过夜或37℃封闭2小时;该步骤对于一些抗原,可省略
2次。末次免疫后10d断尾取血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体效价。其效价大于1:1024,再以1×10 8 CFU/ml浓度0.5ml,加强免疫一次。第三天后取致敏Balb/c小鼠细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞用PEG作融合。经ELISA筛选后,选择分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞,以有限稀释法作克隆共4次。取杂交瘤细胞腹腔注入Balb/c小鼠,2周后收集腹水,离心(1500g)10min,去除细胞沉淀及脂肪,其腹水为Hp-mAb。ELISA筛选,Hp109超声粉碎抗原
1~100ug,细胞抗原107个/20mL脾细胞悬液,细胞性抗原需经60Co照射或用固定剂短暂固定。可采取体内和体外联合免疫法-即体内免疫采用脾内法,腹腔或皮下多点注射2~3次。融合前加强免疫改为体外诱导法。常规方法是取免疫过的小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,用完全培养液悬浮细胞,加入rHulL-2、rHulL-6、PWM和特异性免疫原,使其终浓度分别为50U/mL、500 U/mL、1?200和500 ug/mL,置5% CO2,37℃温箱中培养5d后,收获细胞供融合用。(二)杂交瘤选择骨髓瘤是一种抗体
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