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- 文献和实验
- 技术资料
- 检测范围:
0.32-20 ng/mL
- 检测方法:
Sandwich
- 灵敏度:
0.11 ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1960.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2800.0 |
采用 Sandwich ELISA 方案,适用样本为血清、血浆、组织匀浆及其他生物液体。
小鼠白介素1受体关联激酶3(IRAK3)酶联免疫吸附检测试剂盒适合聚焦信号传导、分子机制与差异表达研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,用于定量检测样本中 IRAK3 水平变化,帮助开展分组比较、表达差异分析与机制验证。
核心优势是采用 Sandwich ELISA 方案,单次实验约 3.5 小时、每孔样本量 100 μL,兼顾常规批量检测效率与结果对比需求。
适用样本包括 血清、血浆、组织匀浆及其他生物液体,检测范围 0.32-20 ng/mL,灵敏度 0.11 ng/mL。
| 英文名称 | Mouse IRAK3(Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 3) ELISA Kit |
|---|---|
| 相关别称 | IRAK-M; IRAKM; IL-1 receptor-associated kinase M |
| 货号 | ELK0183 |
| 品牌 | ELK Biotechnology 科鹿生物 |
| 规格 | 48T / 96T |
| 检测方法 | Sandwich |
| 适用样本 | 血清、血浆、组织匀浆及其他生物液体 |
| 检测范围 | 0.32-20 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.11 ng/mL |
| 标准品 | 20 ng/mL |
| Uniprot ID | Q8K4B2 |
| 研究领域 | 信号传导、酶&激酶、肿瘤免疫、感染免疫学、血液学 |
| 组分 | 48T | 96T | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| 酶标板(可拆)(Pre-coated Microplate) | 6 条 × 8 孔 | 12 条 × 8 孔 | 4℃ / -20℃ |
| 冻干标准品(Standard (lyophilized)) | 1 | 2 | 4℃ / -20℃ |
| 标准品&样品稀释液(Standard/Sample Diluent Buffer) | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩生物素化抗体(100×)(Biotinylated Antibody (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 生物素化抗体稀释液(Biotinylated Antibody Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩HRP 酶结合物(100×)(Streptavidin-HRP (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 酶结合物稀释液(HRP Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩洗涤液(25×)(Wash Buffer (25×)) | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 显色底物溶液(TMB)(TMB Substrate Solution) | 6 mL | 10 mL | 4℃ / -20℃(避光) |
| 反应终止液(Stop Reagent) | 3 mL | 6 mL | 4℃ / -20℃ |
| 封板覆膜(Plate Covers) | 1 | 2 | 常温 |
| 产品说明书(Instruction Manual) | 1 份 | 1 份 | 常温 |

- 试剂盒和样本室温平衡后,每孔加入标准工作缓冲液100 μL(按说明书梯度稀释)或样品100 μL, 37℃孵育80 分钟。
- 弃去酶标板中液体,每孔加入200 μL洗涤缓冲液,洗涤3 次。 拍干后,每孔加入100 μL 生物素化抗体工作液,37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板中液体,每孔加入200 μL洗涤缓冲液,洗涤3 次。拍干后,每孔加入100 μL HRP 酶工作液,37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板内液体,每孔加入200 μL洗涤缓冲液,洗涤5 次。拍干后, 每孔加入90 μL TMB, 37℃孵育20 min。
- 每孔加入50 μL终止液,450 nm 立即读数,计算结果。
小鼠白介素1受体关联激酶3(IRAK3)酶联免疫吸附检测试剂盒采用夹心法原理。将特异性抗小鼠 IRAK3 抗体包被于96孔微孔板中,向微孔中分别加入小鼠 IRAK3 标准品或样本,使标准品中的小鼠 IRAK3 蛋白或样本中的小鼠 IRAK3 蛋白与固相于微孔板上的抗小鼠 IRAK3 抗体结合,然后加入生物素化抗小鼠 IRAK3 抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP 标记链亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB 底物显色。TMB 在过氧化物酶催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠 IRAK3 蛋白呈正相关。用酶标仪在450 nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过绘制标准曲线计算出样品浓度。
标准曲线
| Concentration (ng/mL) | OD | Corrected OD |
|---|---|---|
| 20.00 | 2.202 | 2.104 |
| 10.00 | 1.608 | 1.510 |
| 5.00 | 1.027 | 0.929 |
| 2.50 | 0.866 | 0.768 |
| 1.25 | 0.558 | 0.460 |
| 0.63 | 0.339 | 0.241 |
| 0.32 | 0.197 | 0.099 |
| 0.00 | 0.098 | 0.000 |

精密度
板内精密度(测定内的精密度): CV% < 8%
三个已知浓度的样品分别在1个酶标板上测试20 次,以评估分析板内精密度。
板间精密度(测定板间间精密度): CV% < 10%
三个已知浓度的样品分别在3个不同的酶标板上测试40 次,以评估分析板间的精密度。
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的小鼠 IRAK3, 做回收率实验,得出回收率范围和平均回收率
| 样本类型 | 回收率范围 | 平均回收率 |
|---|---|---|
| 血清(n=5) | 95-107% | 101% |
| EDTA 血浆(n=5) | 90-105% | 97% |
| Heparin 血浆(n=5) | 78-90% | 84% |
线性
将添加有小鼠 IRAK3的样本分别稀释2 倍,4 倍,8 倍,16 倍做回收实验,得出回收率范围
| 样本类型 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
|---|---|---|---|---|
| 血清(n=5) | 88-97% | 91-105% | 87-98% | 95-105% |
| EDTA 血浆(n=5) | 91-99% | 83-89% | 88-94% | 87-93% |
| Heparin 血浆(n=5) | 85-104% | 83-96% | 96-102% | 88-95% |
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文献和实验摘要 脂多糖(LPS)通过与膜受体CD14作用将信号从胞外传到胞核而刺激多种细胞合成和释放TNF-α、IL-1和IL-6等 生物 活性物质而表现复杂的 生物 学活性,但其详细机制尚未完全清楚。本文就近年来对LPS激活巨噬细胞的信号传导机制的研究作一简要综述。 关键词:内毒素;信号传导;内毒素结合蛋白;蛋白酪氨酸激酶 内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁的组成成份,其化学本质为脂多糖,为细菌死亡或活跃繁殖时所释放。LPS
,平均批间变异系数为11.4%;液相芯片与ELISA法检测结果的相关系数R2为0.88~0.99。 国外多家公司已推出了商品化的细胞因子液相芯片检测试剂盒,比如R&D 公司的Flurokine MAP系列、Linco Research公司的LINCOplex 试剂盒、BioSource公司的Antibody Bead Kit、Bio Rad公司的Bio Plex系列等,可用于来自人、小鼠、大鼠的样品,既有一次检测单种细胞因子的试剂盒,也有预先混合多种细胞因子抗体交联微球而一次检测多个指标
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