- ￥2240 - 3200
- ELK Biotechnology 科鹿生物
- 0.16-10 ng/mL
- 0.052 ng/mL
- ELK9561
- 2026年06月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100+
- 检测范围：
0.16-10 ng/mL
- 检测方法：
Sandwich
- 灵敏度：
0.052 ng/mL
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥2240.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥3200.0 |
采用 Sandwich ELISA 方案，适用样本为组织匀浆、cell lysates及其他生物液体。
人酪氨酸蛋白磷酸酶非受体类型5（PTPN5）酶联免疫吸附检测试剂盒适合聚焦信号传导、分子机制与差异表达研究的实验室，尤其适合组织样本相关定量验证，用于定量检测样本中 PTPN5 水平变化，帮助开展分组比较、表达差异分析与机制验证。
核心优势是采用 Sandwich ELISA 方案，单次实验约 3.5 小时、每孔样本量 100 μL，兼顾常规批量检测效率与结果对比需求。
适用样本包括 组织匀浆、cell lysates及其他生物液体，检测范围 0.16-10 ng/mL，灵敏度 0.052 ng/mL。
| 英文名称 | Human PTPN5（Tyrosine-Protein Phosphatase Non-Receptor Type 5） ELISA Kit |
|---|---|
| 相关别称 | FLJ14427; Neural specific protein tyrosine phosphatase; Neural-specific protein-tyrosine phosphatase; Protein tyrosine phosphatase non receptor type 5 (striatum enriched); Protein tyrosine phosphatase non receptor type 5; Protein tyrosine phosphatase striatum enriched; PTN5; PTN5_HUMAN; PTP STEP; PTPN 5; Ptpn5; PTPSTEP; STEP; Striatum-enriched protein-tyrosine phosphatase; Tyrosine protein phosphatase non receptor type 5; Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 5; |
| 货号 | ELK9561 |
| 品牌 | ELK Biotechnology 科鹿生物 |
| 规格 | 48T / 96T |
| 检测方法 | Sandwich |
| 适用样本 | 组织匀浆、cell lysates及其他生物液体 |
| 检测范围 | 0.16-10 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.052 ng/mL |
| 标准品 | 10 ng/mL |
| Uniprot ID | P54829 |
| 研究领域 | 神经学、信号传导 |
| 组分 | 48T | 96T | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| 酶标板（可拆）（Pre-coated Microplate） | 6 条 × 8 孔 | 12 条 × 8 孔 | 4℃ / -20℃ |
| 冻干标准品（Standard (lyophilized)） | 1 | 2 | 4℃ / -20℃ |
| 标准品&样品稀释液（Standard/Sample Diluent Buffer） | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩生物素化抗体（100×）（Biotinylated Antibody (100×)） | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 生物素化抗体稀释液（Biotinylated Antibody Diluent） | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩HRP 酶结合物（100×）（Streptavidin-HRP (100×)） | 60 μL | 120 μL | 4℃ / -20℃ |
| 酶结合物稀释液（HRP Diluent） | 6 mL | 12 mL | 4℃ / -20℃ |
| 浓缩洗涤液（25×）（Wash Buffer (25×)） | 10 mL | 20 mL | 4℃ / -20℃ |
| 显色底物溶液（TMB）（TMB Substrate Solution） | 6 mL | 10 mL | 4℃ / -20℃(避光） |
| 反应终止液（Stop Reagent） | 3 mL | 6 mL | 4℃ / -20℃ |
| 封板覆膜（Plate Covers） | 1 | 2 | 常温 |
| 产品说明书（Instruction Manual） | 1 份 | 1 份 | 常温 |
- 试剂盒和样本室温平衡后，每孔加入标准工作缓冲液100 μL（按说明书梯度稀释）或样品100 μL, 37℃孵育80 分钟。
- 弃去酶标板中液体，每孔加入200 μL洗涤缓冲液，洗涤3 次。 拍干后，每孔加入100 μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板中液体，每孔加入200 μL洗涤缓冲液，洗涤3 次。拍干后，每孔加入100 μL HRP 酶工作液，37℃孵育50 分钟。
- 弃去酶标板内液体，每孔加入200 μL洗涤缓冲液，洗涤5 次。拍干后， 每孔加入90 μL TMB, 37℃孵育20 min。
- 每孔加入50 μL终止液，450 nm 立即读数，计算结果。
人酪氨酸蛋白磷酸酶非受体类型5（PTPN5）酶联免疫吸附检测试剂盒采用夹心法原理。将特异性抗人 PTPN5 抗体包被于96孔微孔板中，向微孔中分别加入人 PTPN5 标准品或样本，使标准品中的人 PTPN5 蛋白或样本中的人 PTPN5 蛋白与固相于微孔板上的抗人 PTPN5 抗体结合，然后加入生物素化抗人 PTPN5 抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP 标记链亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB 底物显色。TMB 在过氧化物酶催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人 PTPN5 蛋白呈正相关。用酶标仪在450 nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过绘制标准曲线计算出样品浓度。
标准曲线
| Concentration (ng/mL) | OD | Corrected OD |
|---|---|---|
| 10.00 | 2.266 | 2.198 |
| 5.00 | 1.585 | 1.517 |
| 2.50 | 1.135 | 1.067 |
| 1.25 | 0.813 | 0.745 |
| 0.63 | 0.529 | 0.461 |
| 0.32 | 0.335 | 0.267 |
| 0.16 | 0.238 | 0.170 |
| 0.00 | 0.068 | 0.000 |
精密度
板内精密度（测定内的精密度）： CV% < 8%
三个已知浓度的样品分别在1个酶标板上测试20 次，以评估分析板内精密度。
板间精密度（测定板间间精密度）： CV% < 10%
三个已知浓度的样品分别在3个不同的酶标板上测试40 次，以评估分析板间的精密度。
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的人 PTPN5， 做回收率实验，得出回收率范围和平均回收率
| 样本类型 | 回收率范围 | 平均回收率 |
|---|---|---|
| 血清（n=5） | 83-99% | 95% |
| EDTA 血浆（n=5） | 85-99% | 92% |
| Heparin 血浆（n=5） | 87-99% | 93% |
线性
将添加有人 PTPN5的样本分别稀释2 倍，4 倍，8 倍，16 倍做回收实验，得出回收率范围
| 样本类型 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
|---|---|---|---|---|
| 血清（n=5） | 87-98% | 83-96% | 87-98% | 85-97% |
| EDTA 血浆（n=5） | 97-105% | 84-96% | 87-98% | 86-95% |
| Heparin 血浆（n=5） | 81-96% | 87-96% | 83-101% | 87-98% |
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文献和实验。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素膜NC膜 ）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。其图解为： Western Blot显色的方法主要有以下几种： i. 放射自显影 ii. 底物化学发光ECL iii. 底物荧光ECF iv
)、碱性磷酶（alkaline phosphatase）等。它们与抗体结合不影响抗体活性。这些酶具有一定的稳定性，制成酶标抗体可保存较长时间。目前常用的方法有酶标免疫组化法和酶联免疫吸附法。前者测定细胞表面抗原或组织内的抗原；后者主要测定可溶性抗原或抗体。本法既没有放射性污染又不需昂贵的测试仪器，所以较放射免疫分析法更易推广。 （1）酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）:是与上述固相RIA相似的原理，将抗原或抗体吸附在固相载体
吸附或化学偶联。用聚苯乙烯做载体包被抗原（抗体）常用吸附的方法。4℃过夜或37℃2～6h经清洗后即可应用。为防止包被后载体上留有未包被的空隙而导致本底过高，常用1％～5％牛血清白蛋白封闭空隙。 3．最佳工作浓度的选择：在酶联免疫吸附试验中为防止本底高和灵敏度低，需要对包被抗体（抗原）和酶标抗体（抗原或二抗）进行滴定和选择最佳工作浓度。如夹心法最佳工作浓度的选择是用棋盘滴定法同时选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。如表三所示包被抗体选择3个浓度酶标抗体也选择3个浓度分别与包被抗体的3个浓度配伍
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