微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease, M

规格： 320KU/1600KU 规格： 320KU 产品价格： ￥398.0 规格： 1600KU 产品价格： ￥1296.0 碧云天生产的微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease, MNase)，也被称为Micrococcal Endonuclease或S7 Nuclease，是一种来源于Staphylococcus aureus的核酸内切酶，CAS号为9013-53-0，分子量约18.6kDa，在pH7.0-10.0和Ca2+的条件下可降解单链、双链、线状、环状等多种形式的DNA或RNA，并产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸。MNase对单链核酸的切割效率比双链核酸更高。MNase在腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)或尿嘧啶(U)的5'侧的切割效率是鸟嘌呤(G)或胞嘧啶(C)的约30倍，能较好地酶解富含AT或AU区域，所以MNase是“相对”非特异性的核酸内切酶，常用于去除细胞裂解液中的核酸等[1]。另外，MNase仅酶解核小体连接区的DNA，而核小体上的DNA被组蛋白保护而不被MNase酶解，因此MNase也常被应用于染色质免疫沉淀实验中的染色质片段化。 染色质免疫沉淀(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP)的原理是在活细胞状态下交联或不交联蛋白质-DNA复合物，通过超声或MNase酶处理将染色质(Chromatin)随机切断为小片段，然后利用特异性抗体，将与目的蛋白与相结合的DNA片段免疫沉淀，通过多种下游检测技术(定量PCR、PCR、Southern、基因芯片、高通量测序等)来检测免疫沉淀的DNA片段的序列。ChIP通常用于检测转录因子(Transcription factors)或组蛋白(Histone)等基因组DNA结合蛋白是否和预期的特定基因组DNA序列如启动子(Promoter)、增强子(Enhancer)等在同一复合物中，对于研究基因转录调控和表观遗传至关重要[2-3]。 染色质免疫沉淀根据对染色质的处理方式不同，分为交联染色质免疫沉淀(Cross-linked ChIP, X-ChIP)和非交联染色质免疫沉淀(Native ChIP, N-ChIP)。交联染色质免疫沉淀：甲醛等交联染色质后使用超声波破碎或者MNase酶处理获得200-1000bp的DNA片段，适合研究与DNA或组蛋白亲和力较弱的蛋白质，交联可以使它们保持在适当的位置并避免蛋白质从相应的DNA结合位点解离；非交联染色质免疫沉淀：不需要交联，未经处理的染色质通常使用MNase酶处理将染色质酶解为含有1-5个核小体(Nucleosome, ～200bp/个)的片段，适合研究特定组蛋白修饰的DNA结合位点。两种染色质免疫沉淀的优缺点总结如下表，可根据实验目的进行选择 [4]。