- ￥498
- 雅酶
- MH102
- 2026年05月04日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 规格：
100次
一步法cDNA第一链合成预混试剂(去基因组)
One-step First-Strand cDNA Synthesis Premix (with dsDNase)
本产品需冰袋运输；-20℃保存，保质期24个月。
货号规格
goodMH102 100次
产品内容
产品简介
good本产品是一款高效、便捷、稳定，并可去除基因组DNA污染的cDNA第一链合成预混试剂，其核心成分一一经分子改造的第三代M-MLV逆转录酶，连同反应缓冲液、RNA酶抑制剂、dNTPs、Oligo(dT)20VN引物和随机引物等反应所需组分全部汇于一管，仅需加入RNA模板和水即可进行反应。使用本产品获得的cDNA，下游可用于qPCR、普通PCR等实验。good此外,本产品配备的 dsDNase 可以高效去除基因组 DNA 污染，相较于常规的 DNase l，dsDNase能够特异性的消化双链 DNA(包括 DNA与 RNA 的杂合链)，并且具有热敏感性，可在高温条件下快速不可逆地失活，从而无需额外加入 EDTA 进行失活，不仅节省实验时间，而且避免了EDTA 对逆转录反应的抑制作用。
注意事项
good1.本产品预混液中已经包含 Oligo(dT)20VN和随机引物，不仅适用于包含Poly(A)结构的真核生物 mRNA,也适用于不含Poly(A)结构的原核生物RNA、真核生物rRNA 和 tRNA 等模板，但不适用于miRNA等小RNA模板；
good2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
good3. 本产品仅限科研使用。
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文献和实验的动态范围或线性度最佳，可确保基因表达定量的准确性。 所选试剂在扩增过程中应产生较高且一致的 cDNA 得率，以获得具有高灵敏度和低变异性的基因表达结果。可考虑预混液形式的逆转录酶用以可以减少实验误差。 RT-qPCR 的一个特殊程序是从未经 RNA 分离的粗细胞裂解物直接进行逆转录。在使用稀缺样本或选用群体内特定细胞的实验，可考虑使用直接 RT-qPCR 法来防止可能的样本损失和低 RNA 回收。 cDNA 克隆和文库构建 cDNA 文库可由代表特定样本中转录序列的 cDNA 克隆组成
分离高质量RNA 成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。RNA的质量决定了你能够转录到cDNA上的序列信息量的最大值。一般的RNA纯化方法是使用异硫氰酸胍／酸性酚的一步法。Trizol试剂法（见下图）将一步法加以提高，可以从多种组织和细胞中提取高质量的非降解RNA。Trizol试剂法可以从最少100个细胞或1mg组织中提取RNA。TRIzol®试剂步骤略图 一般不必使用oligo(dT)选择性分离poly
transcription，RT）与 PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中少于 10 个拷贝的 RNA 模板。 RNA 扩增包括两个步骤： 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下，合成 RNA 的互补 cDNA；加热后 cDNA 与 RNA 链解离，然后与另一引物退火，并由 DNA 聚合酶催化引物延伸生成双链靶 DNA， 最后扩增靶 DNA。 cDNA 第二链的合成方法有以下几种: 1、自身引导法： 合成的单链 cDNA 3' 端能够形成一短的发夹结构，这就为第二链的合成提供了现成的引物，当第一链合成反应
