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- LABLEAD
- GGGT240
- 2025年12月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 规格：
240T
一般说明
谷胱甘肽(GSH)是多种抗氧化酶的辅因子。它参与维生素C和维生素E再生，调节细胞增殖和凋亡。谷胱甘肽对线粒体功能和维持线粒体DNA(mtDNA)至关重要。其基因的突变与阿尔兹海默症、帕金森病和亨廷顿病有关。它还与囊性纤维化、免疫疾病和心血管疾病有关。还原型谷胱甘肽(GSH)，是三肽类化合物 (g-谷氨酸-半胱氨酰甘氨酸)，是大多数活细胞中主的自由巯基，参与多种生物学过程，如：外来化合物解毒，清除过氧化氢物，维持蛋白巯基化物的氧化状态。它是动物组织中重要的抗氧化物质。本测试利用DTNB能与还原型谷胱甘肽反应产生黄色产物特性，在波长为412nm下检测，其吸光度与样本中谷胱甘肽的含量对成正比；最低可检测0.4μM的GSH。
产品应用：
检测血清、血浆、尿液、组织和细胞提取物中的还原型谷胱甘肽含量。
试剂盒规格和保存
试剂A：30 mL 4°C保存
试剂B：30 mL 4°C保存
校准品：10 mL 4°C保存
样本制备：
注意：使用前须置试剂至室温，并充分摇匀试剂A。
全血样本需用水稀释20倍（n = 20）。
检测步骤：
1.准备空白对照：300μL水；
稀释校准品：100μL校准品+200μL水，分别放入透明平底96孔板。
2. 样本：全血样本需用水稀释20倍（n = 20）。在1.5mL离心管中混合120μL样本和120μL试剂A。如果出现浑浊，在转速14000rpm下离心5分钟。
3. 取200μL样混合物放入96孔板的孔中，加入100μL的试剂B，轻敲使其混合。
4. 室温下反应30分钟，在412nm的波长下读取OD值。
计算：
谷胱甘肽的浓度为
n是稀释因数。
单位换算: 10mg/L谷胱甘肽= 32.5μM
细胞裂解液制备：在4°C、1000g下离心收集2x106个细胞，用冷PBS溶液清洗，并在1-2毫升含有50 mM MES（或磷酸盐 pH 6-7）和1 mM EDTA的冷缓冲剂中，通过细胞匀浆或超声波降解法溶解细胞。在4°C、10000g下离心15分钟，取上清液进行检测。注意：β－巯基乙醇、二硫苏糖醇、半胱氨酸会干扰检测，在样本准备中应避免接触。氨基酸不会产生干扰。
预防措施：试剂仅用于实验研究，使用过程中请遵循实验室试剂安全措施。
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文献和实验C10 H17 N3 SO6 。为γ -L-谷氨酰 -L-半胱氨酞甘氨酸（ 1）。谷胱甘肽如（ 2）所示在活体内参与氧化还原反应。所以具有保护如组织蛋白酶、番木瓜酶及琥珀酸脱氢酶那样具有 SH基酶的 SH基作用。另外是催化甲基乙二醛形成乳酸的乳酰谷胱甘肽裂解酶（ EC． 4． 4． 1． 5）不可缺少的辅助基质。在解毒作用中形成硫醚氨酸，被认为有毒物质先与谷胱甘肽结合使谷氨酸与甘氨酸部分切断。
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
谷胱甘肽是属于含有巯基的、小分子肽类物质，具有两种重要的抗氧化作用和整合解毒作用。谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合而成的三肽，半胱氨酸上的巯基为其活性基团（故谷胱甘肽常简写为G-SH），易于碘乙酸、芥子气（一种毒气）、铅、汞、砷等重金属盐络合，而具有了整合解毒作用。谷胱甘肽（尤其是肝细胞内的谷胱甘肽）具有非常重要的生理作用就是整合解毒作用，能与某些药物（如扑热息痛）、毒素（如自由基、重金属）等结合，参与生物转化作用，从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质，排泄出体外。
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