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文献和实验层粘连蛋白(Laminin,LN)是一种主要存在于上皮细胞外基质中的大分子非胶原性糖蛋白(分子量约为20~40万)。其功能与FN相似,影响着胚胎细胞的发育和胚胎团块的形成。现已发现LN与神经细胞的运动、分化及肿瘤的转移关系密切。许多研究都表明LN是机体中一种重要的糖蛋白组分。因此,分离提纯LN将为我们深入地研究细胞外环境与细胞运动、增殖、分化之间的关系,研究肿瘤转移的机制提供方便。 基于LN主要存在于基膜中,我们选择含有大量的EHS小鼠肉瘤为材料,用一定
(一)基底膜的结构 基底膜一般是由纤维的结缔组织,粘多糖和蛋白质所构成,电镜可分为三层,即中间层(电子密度较高的致密层)内层和外层(电子密度较低疏松层)。基底膜内主要含有IV形 胶原蛋白 ,蛋白多糖和层粘连蛋白,这些物质的存在,给显示基底膜提供了物质基础。 (二)显色的方法 1.六胺银法(Hexamine silver) Jones六胺银染色法的改良法[5] I. 试剂
远高于胰蛋白酶、胶原蛋白酶或其他蛋白分解酶。分散酶性质温和,回收细胞不会受损,仍可用于传代培养。 适用于干细胞类器官研究的基底膜提取物(BME)的制备 干细胞合格的ECM凝胶基质(CC131)是从Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)肿瘤中纯化的可溶性基底膜提取物(BME),其已被预先鉴定用于人ES/iPS细胞培养。基质在20-40 °C下聚合,形成重构的基底膜。该产品含有层粘连蛋白、IV型胶原蛋白、巢蛋白和硫酸乙酰肝素等ECM。该基质省却了耗时的预筛选和批次识别的需要,为多能人ES
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