- ￥2000
- 默认不含修饰碱基
- 南京
- 2025年12月19日
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- 详细信息
- 技术资料
- 提供商：
宜明生物
- 服务名称：
IncRNA synthesis and purification
一、服务概述
IncRNA synthesis and purification 服务专注于长链非编码 RNA（Long non-coding RNA, IncRNA）的体外定制合成与高纯度纯化，为表观遗传学、基因调控机制研究领域的科研机构、生物医药企业提供从序列设计、专项制备到严格质控的一站式解决方案。
IncRNA 作为长度≥200nt 的非编码 RNA，通过调控染色质状态、mRNA 加工、蛋白互作等参与多种生命活动，是疾病机制探索、新型 biomarker 发现及基因治疗靶点研究的核心工具。本服务针对 IncRNA 片段长、二级结构复杂、易降解的技术痛点，采用长链 RNA 专属合成体系与定制化纯化工艺，高效合成高活性 IncRNA，结合多维度质控（如完整性检测、功能活性验证）确保产品满足细胞转染、动物模型构建等实验需求，助力客户突破 IncRNA 研究技术瓶颈。
二、核心优势
1. 长链专属合成体系，攻克复杂结构合成难题
针对 IncRNA（通常 200-10000nt）易形成发卡、茎环等复杂二级结构，导致转录终止、产物降解的痛点，研发长链 RNA 专属体外合成体系：
- 高延伸性聚合酶：采用经突变优化的重组 T7/T3 RNA 聚合酶（延伸能力提升 80%），搭配含结构解旋辅助因子的缓冲液，有效抑制转录过程中的链终止现象，使长链 IncRNA（如 5000nt）完整产物比例≥85%，较传统体系合成效率提升 60% 以上；
- 抗降解保护策略：添加 RNA 稳定剂（如 RNA 伴侣蛋白、抗氧化剂）与 RNase 抑制剂，减少长链 RNA 因折叠聚集导致的降解，确保产物活性保留率≥95%；
- 复杂序列适配：针对高 GC 含量（＞65%）、重复序列（如卫星 RNA）等特殊 IncRNA，通过序列预优化（调整碱基分布、引入修饰碱基）与转录温度梯度调控，解决合成效率低、产物不均一的问题。
2. 精准序列定制，适配多类 IncRNA 功能研究
基于专业生物信息学平台，提供高度个性化的 IncRNA 序列设计与合成服务：
- 功能区域定制：根据客户研究需求（如调控特定基因表达、模拟疾病相关 IncRNA），精准合成含启动子结合区、蛋白互作结构域、miRNA 海绵序列等功能片段的 IncRNA，支持全长或截短体合成；
- 修饰选项丰富：支持 5' 端帽子结构（m7GpppG、Cap 1）、3' 端 polyA 尾（50-200nt 可调）、荧光标记（FAM/Cy3/Cy5，用于亚细胞定位追踪）、生物素标记（用于 RNA - 蛋白 / DNA 互作研究）及化学修饰（2'-O - 甲基化、假尿苷，提升稳定性与降低免疫原性）；
- 对照体系完善：提供阴性对照（非靶向序列、 scramble IncRNA）、阳性对照（已知功能 IncRNA，如 HOTAIR、XIST），方便客户设置实验对照，确保结果可靠性。
3. 分级纯化工艺，保障长链 RNA 高纯度与低杂质
针对 IncRNA 分子量大、易吸附杂质的特性，采用 “磁珠预纯化 - 离子交换层析 - 凝胶过滤” 三级纯化策略：
- 磁珠预纯化：通过长链 RNA 特异性结合磁珠，高效去除未反应核苷酸、短片段 RNA（＜100nt）及部分蛋白杂质；
- 离子交换层析：采用弱阴离子交换柱（针对长链 RNA 电荷特性优化洗脱梯度），精准分离完整 IncRNA 与 DNA 模板、聚合酶等杂质，确保主峰纯度≥98%；
- 凝胶过滤：使用琼脂糖凝胶过滤柱，去除残留小分子杂质与盐类，同时避免长链 RNA 因反复浓缩导致的断裂。最终产品内毒素含量＜0.05 EU/μg，RNase 残留＜0.01 U/μg，满足原代细胞、干细胞等敏感细胞的转染需求。
4. 全流程质控，聚焦 IncRNA 功能有效性
建立针对 IncRNA 的专项质控体系，覆盖 “合成 - 纯化 - 功能验证” 全流程：
- 结构完整性检测：采用 Agilent Bioanalyzer（RNA 6000 Pico Kit）与 1% 琼脂糖凝胶电泳，确保 IncRNA 无明显降解（完整片段比例≥85%），分子量与理论值偏差＜2%；
- 浓度与纯度检测：通过 Qubit 荧光定量仪（RNA 高灵敏度试剂盒）与 Nanodrop 检测，确保 A260/A280 比值 1.8-2.1，A260/A230 比值≥2.0（无盐类与有机物污染）；
- 功能活性验证：根据 IncRNA 功能类型（如 miRNA 海绵、转录调控因子），提供针对性活性检测：如通过双荧光素酶报告基因实验验证 miRNA 结合能力，通过 ChIRP-seq（RNA 亲和纯化测序）验证 DNA 结合区域，确保 IncRNA 功能活性达标；
- 稳定性检测：通过 zeta 电位检测评估 IncRNA 胶体稳定性（电位绝对值≥15mV，避免储存中聚集），并提供 4℃、-20℃、-80℃储存条件下的稳定性数据（监测 2 个月内的完整性与活性变化）。每批次产品提供详尽质检报告，批次间性能差异＜5%，为实验结果的可重复性提供保障。
5. 灵活交付与增值服务，适配 IncRNA 研究节奏
配备 IncRNA 专项生产与质控团队，标准订单 7-10 个工作日内完成交付（超长链 IncRNA＞5000nt 需额外 2-3 个工作日），加急订单最快 5 个工作日出具产物；支持从 μg 级（科研小试，如细胞系功能验证）到 mg 级（中试生产，如动物体内实验）的产量定制，可根据客户需求分批次交付（避免反复冻融影响长链 RNA 活性）。针对高通量 IncRNA 筛选项目，提供批量合成服务，并可提供混样、分装（按实验需求分至 96 孔 / 384 孔板）及与转染试剂的预混合服务，大幅提升实验效率。
三、服务规格与交付内容
1. 服务规格
| 服务项目 | 服务详情 |
| 合成类型 | 全长 IncRNA、截短体 IncRNA、功能区域片段、对照 IncRNA |
| 合成长度 | 200-10000nt（常规），支持＞10000nt 超长链 IncRNA 定制（需提前评估可行性） |
| 修饰选项 | 5' 端：帽子结构、磷酸化、荧光标记、生物素；3' 端：polyA 尾、荧光标记、生物素；全链修饰：2'-O - 甲基化、假尿苷、m6A |
| 产量范围 | 1μg-50mg（可根据需求定制更大规模） |
| 适配场景 | 细胞水平 IncRNA 功能研究、动物体内 IncRNA 干预实验、RNA - 蛋白 / DNA 互作研究、疾病 biomarker 验证 |
2. 检测项目
| 检测内容 | 周期 |
| Total Potein Residue | 一周 |
| Plasmid DNA Residue | 一周 |
| dsRNA residue | 一周 |
| Endotoxin assay | 一周 |
| BioBurden | 两周 |
3. 交付内容
- 高纯度 IncRNA 样本：无菌无酶低吸附离心管分装（避免长链 RNA 吸附管壁，50-500μL / 管），干冰运输，-80℃储存可稳定保存 12 个月以上（建议分装后避免反复冻融）；
- 完整质检报告：根据客户需求可提供包含浓度 / 纯度数据、电泳图谱（Bioanalyzer 与琼脂糖凝胶）、功能活性验证报告（如双荧光素酶数据、ChIRP-seq 结果摘要）、修饰效率检测（如适用）、内毒素与 RNase 残留检测报告；
- 使用指南：涵盖 IncRNA 溶解方法（推荐使用无酶水，温和混匀）、转染条件优化建议（如转染试剂选择、IncRNA 浓度梯度设置）、储存与稳定性说明、功能检测方法参考（如 RNA-FISH、RIP 实验操作要点）；
- 原始数据文件：根据客户需求可提供包含电泳原始图谱、荧光定量数据、功能验证实验原始数据（如测序原始数据、灰度分析结果），方便客户追溯与发表需求。
四、应用场景
1. 基因调控机制研究
用于细胞系中 IncRNA 功能验证，如通过过表达 / 沉默特定 IncRNA，检测其对靶基因转录（qPCR）、蛋白表达（Western blot）及染色质状态（ChIP-seq）的影响，解析 IncRNA 在细胞分化、周期调控、信号通路中的作用机制（如探索 IncRNA 在胚胎干细胞干性维持中的调控网络）。
2. 疾病机制探索与 biomarker 验证
在疾病模型（如肿瘤细胞系、动物疾病模型）中，通过合成疾病相关 IncRNA（如致癌 IncRNA H19、抑癌 IncRNA MEG3），研究其在疾病发生发展中的作用（如促进肿瘤增殖、转移）；同时可将合成的 IncRNA 作为标准品，用于临床样本中 IncRNA 表达水平的定量检测（如 qPCR 校准），验证其作为疾病诊断 / 预后 biomarker 的可行性。
3. RNA - 蛋白 / DNA 互作研究
通过合成生物素标记的 IncRNA，结合 RNA 免疫沉淀（RIP）、染色质分离 RNA 纯化（ChIRP）、RNA pull-down 等技术，筛选与 IncRNA 相互作用的蛋白（如转录因子、组蛋白修饰酶）或 DNA 区域（如启动子、增强子），揭示 IncRNA 发挥功能的分子伴侣与作用靶点，为后续机制解析提供关键线索。
4. 药物研发与靶点验证
在药物研发早期，通过合成 IncRNA 模拟其在疾病状态下的异常表达，评估候选药物对 IncRNA 功能的调控效果（如抑制致癌 IncRNA 的表达或活性）；同时可将 IncRNA 作为潜在治疗靶点，通过设计靶向 IncRNA 的小分子药物或核酸药物（如 siRNA、ASO），验证其对疾病模型的干预效果，加速药物研发进程。
五、服务流程与技术支持
1. 服务流程
- 需求沟通：客户提供 IncRNA 序列（或靶基因 / 功能需求）、修饰需求、产量要求及功能验证方向，技术团队提供序列设计方案（含二级结构预测与优化建议）、对照 IncRNA 推荐及方案报价；
- 序列确认与合成：客户确认序列后，启动长链 RNA 专属合成流程，全程监控转录过程（通过实时电泳监测产物完整性）；
- 纯化与质控：完成合成后进行分级纯化，同步开展专项质控检测（含功能活性验证）；
- 交付与售后：质检合格后，产品与报告同步交付，提供后续实验技术支持。
2. 技术支持
- 专业咨询：提供 IncRNA 序列设计（如二级结构优化、功能区域保留）、实验方案设计（如转染方法选择、互作实验技术路线）、数据分析建议（如高通量测序数据解读），协助解决 IncRNA 转染效率低、功能验证结果不稳定等问题；
- 问题解决：针对 IncRNA 降解、活性不达预期等问题，提供 troubleshooting 方案（如调整储存条件、优化修饰类型、更换合成片段）；
- 定制化培训：为客户团队提供 IncRNA 合成与应用相关培训，包括长链 RNA 体外转录原理、纯化技术、功能验证实验操作（如 RIP、ChIRP）等，提升客户自主实验能力。
IncRNA synthesis and purification 服务以 “长链适配、功能导向、稳定可靠” 为核心，通过专项技术优化与严格质控，为 IncRNA 研究领域提供高质量产品与专业服务，助力科研人员与企业突破长链非编码 RNA 研究技术瓶颈，加速表观遗传学与疾病机制研究的创新发展。
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