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▶ 服务介绍
天狼星红染色的原理是利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。天狼星红染色通常用于组织病理学中胶原纤维的染色,其染色原理是:天狼星红染料呈强酸性,易与胶原分子中的碱性基团结合。胶原被染成红色,肌肉纤维被染成黄色。天狼星红染色液主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成,主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。
▶ 实验仪器与试剂
实验仪器
实验主要试剂
▶ 实验步骤
1.石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min-二甲苯III5min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精3min-85%酒精3min-75%酒精3min-65酒精3min%,自来水洗3min。
2.临用前配制铁苏木素染色液,滴加染色5-10min,蒸馏水洗10-20s洗去多余染色液。
3.(可选)自来水浸洗5-10min,蒸馏水清洗3次,每次5-10s。
4.天狼星红染色液滴染15-30min,对于较易上色组织可把染色时间控制在5-10min内。
5.流水稍微冲洗,去除切片表面染液。
6.脱水透明封片:将切片依次放入65%乙醇1min-75%乙醇1min-85%乙醇1min-95%乙醇-无水乙醇1min-二甲苯Ⅰ5min中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。
7.显微镜镜检:图像采集分析。
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文献和实验HE&尼式染色.pdf
组织形态染色 苏丹黑B染色 染色含切片 4%多聚甲醛固定,冰冻切片。对组织内脂质(如脂滴)染色 Masson染色 染色 观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度 天狼猩红染色 染色 观察组织纤维化程度,及偏振光进行胶原亚型的分区 PAS糖原染色 染色 观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化; 肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化 阿利新蓝染色 染色
一、样本准备 详见流式细胞术样本制备技术、流式实验样本制备方法及注意事项 收集细胞,200 目筛网过滤,收集滤液,300 g 离心 5 min,弃上清 向细胞中加入适量细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS),用移液枪轻轻吹打细胞重悬 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为 1 × 107/mL 三、设置实验分组 四、封闭 Fc 受体 封闭 Fc 受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中,纯化的 CD16/CD32 单抗能和 Fc
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