Phosphor-WIPF1（S488）antibody【磷

做了这么多的 WB，你知道化学发光和荧光可以一起检测吗？

，一组使用 NaHS 处理，一组则不作处理；然后用荧光马来酰亚胺染料 Alexa Fluor 488 C5 maleimide（下文简称MAL，Invitrogen，A10254）标记半胱氨酸上的硫醇基团，使正常的半胱氨酸通过 -S- 与 MAL 连接，而硫巯基化的半胱氨酸通过二硫键 -S-S- 与 MAL 连接，如下图： 图 1. 文献 Fig. 6G，硫巯基化分析步骤 接下来加入 DTT，硫巯基化蛋白上特有的二硫键就会被解开，导致荧光 MAL 分子脱落，荧光信号减弱。所以，荧光信号发生变化就验证

【共享】常用抗体标记荧光染料的选择

光信号强度高于AlexaFluor 405染料1.7倍。绿色（488nm处激发）CF 488A、Alexa Fluor 488、FITC、FAM、DyLight 488、Cy2等----针对488nm 氩离子激光器的绿色荧光染料；以上染料其标记的抗体蛋白适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪；流式细胞仪的FL1通道检测；或者可用于荧光显微镜技术；CF 488A最低限度的带电量降低了与抗体耦联物的非特异性结合；在红色通道溢出少于Alexa Fluor 488； 耐光性好； 水溶性好 和 pH 不敏

Metal-Enhanced Immunoassays

overnight. Next, slides were rinsed with water and covered with blocking solution for 2 h at room temperature. Then, after rinsing with water, AlexaFluor-488 labeled anti-mouse antibody conjugate (33 nM in blocking solution) was added to the sample slides