pOTB7-AZI2(末端52bp不一样)

干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密

。其中 IS50R 和 IS50L 的序列高度同源，只是 IS50L 的一个碱基存在突变。IS50 具有 19bp 的倒置末端（ES），外末端 outside end（OE）和内末端 inside end（IE），两末端倒置有 7 个碱基不同。此倒置末端是转座酶（Tnp）的作用位点，在转座过程中，将转座子从供体 DNA 中完全切除，并插入到目标 DNA 中。IS50L 和 IS50R 均含有编码转座酶（TnP）以及转座阻遏蛋白（lnh）的基因，但由于 IS50L 中的碱基突变，造成翻译提前终止，所以仅

【交流】测序常见问题分析

序列？用PCR引物作为测序引物，所测序列是从引物3末端后第一个碱基开始的，所以就找不到您的测序引物了。可以进行反向测序，得到引物的反向互补序列。还可以将所测片段克隆到适当载体中，由于通用引物与插入序列有一段距离，就可以测出您的引物序列。 3：测序结果和文献资料不一样，为什么?原因有很多，如同一种动物，在不同的种族之间，或者不同的个体之间，基因序列也不一定完全一样。如果是PCR产物克隆测序, 那还有PCR过程中的错配因素等等。我们提供的测序结果是客户样品序列的忠实结果，不能保证和文献序列完全

Nat Methods：殷昊团队开发不依赖 DNA 供体高效靶向插入基因组的新方法：GRAND editing

大部分遗传疾病都存在基因缺失或者部分序列错误，靶向性基因插入是治疗疾病的最佳方案之一。如何高效定点插入大片段 DNA 序列也成为基因编辑领域的难点和热点。 利用 CRISPR 基因编辑技术进行靶向插入的经典方法主要是同源重组修复，这种方法通过提供一个外源 DNA 供体，利用细胞自身的同源重组修复机制实现外源 DNA 片段的插入1。由于同源重组修复过程主要发生在细胞有丝分裂的 S/G2 期，限制了在非分裂细胞中的应用。相较于同源重组介导的片段插入，利用非同源末端连接虽然可以在非