(Methyl-5-nitroaniline 618-61

毛泡桐叶中乌索酸的提取分离及反相高效液相色谱分析

　　【摘要】 　　目的提取鉴定毛泡桐叶中的乌索酸，并建立其含量测定方法。方法采用“醇提凝析法”新工艺分离制备乌索酸，IR，MS，NMR 鉴定其结构。建立反相高效液相色谱测定其含量的方法，色谱柱为 KromasilC18 柱，流动相为乙腈-甲醇-水-磷酸（体积比168∶682∶150∶1.68），流速0.8 ml/min，检测波长210 nm，柱温25℃。结果乌索酸在0.92～16.56 μg范围内线性关系良好（r=0.999 6）。样品乌索酸含量为99.61%，得率为30.5%。结论

【资源】蛋白纯化经验指南（）

的填料,颗粒细点,起始盐浓度高点,这样保证能浓缩好你的样品. 35) 楼主：这段在用离子交换柱过抗体，请问抗体的吸收图谱是怎样的？它的特征吸收峰在哪里，不同的多克隆抗体是不是还有自己的特征吸收峰， 抱歉,你是说色谱图还是紫外吸收图呢,蛋白一般都是在280检测的呀,不同的的蛋白虽然有一点差别,但是那也不是很明显的,其实就用280就可以了. 36) 我的蛋白以GST融合蛋白的形式表达在E Coli中，分子量14~15kDa，蛋白的疏水性很强，等电点在7左右。菌破碎后，用表面活性剂提取的融合

蛋白纯化经验指南

沉淀，我用0.5%CHAPS助溶可勉强溶解部分，目的蛋白疏水性比较强。既然是疏水性很强你可以加点甘油或者乙二醇降低极性，这样溶解就会好得多，此外你也直接加2%的PEG这样也降低极性，同时保护你的蛋白，你再做纯化就可以了，我以前遇到这样的蛋白是用10%的乙醇加3-5%的PEG5000，这样的情况下蛋白还是活性回收率很高，我觉得那些表面活性剂能不用还是不用的好，你失去活性你可以监测一下提取，纯化，酶切到底哪里失去了活性，这样更容易解决你的问题。还有注意缓冲液PH值，看看改变它对溶解度有没有影响。蛋白