(5-Methoxy-2-Nitrophenyl)Acryl

高效液相色谱法测定生物样本中头孢噻肟和舒巴坦的浓度

; chromatography, high pressure liquid; plasma; urine 　　【摘要】 目的：　为静滴注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠后在血浆和尿液中的药物浓度分析提供检测方法. 方法：　采用HPLC测定头孢噻肟钠血浆和尿液中浓度. 在血样中加入甲醇沉淀蛋白后，尿样用超纯水稀释后取上清液进样，色谱分析条件: 以C18反相柱作分析柱；柱温：室温；流速： 1 mL/min；头孢噻肟和舒巴坦的流动相分别为：1g/L的三乙胺水溶液（用磷酸调pH值6.2）∶甲醇＝68∶32和84∶16；头孢

【资源】蛋白纯化经验指南（）

时你们一般用多少柱床体积？10X够了吗？ 一般也就3-5个床体积吧，离子交换需要平衡体积大点也，10X足够了 101) 有个关于胰岛素精纯化的问题想向你请教，我已取得95%纯度样品。但杂质大于1%，进一步纯化，用什么柱子，具体操作又怎样做呢，谢谢赐教。 我知道，我好象回复过，你用反相硅胶10um的柱子1.0X25cm或者2.2X25cm的柱子做制备，这样可以达到99%以上的纯度，别的方法很难做到你需要的纯度，此外胰岛素也可以用等电点沉淀的办法去掉一些杂质。 HPLC制备你可以参考

蛋白纯化经验指南

沉淀，我用0.5%CHAPS助溶可勉强溶解部分，目的蛋白疏水性比较强。既然是疏水性很强你可以加点甘油或者乙二醇降低极性，这样溶解就会好得多，此外你也直接加2%的PEG这样也降低极性，同时保护你的蛋白，你再做纯化就可以了，我以前遇到这样的蛋白是用10%的乙醇加3-5%的PEG5000，这样的情况下蛋白还是活性回收率很高，我觉得那些表面活性剂能不用还是不用的好，你失去活性你可以监测一下提取，纯化，酶切到底哪里失去了活性，这样更容易解决你的问题。还有注意缓冲液PH值，看看改变它对溶解度有没有影响。蛋白