(H-5-Methyl-6,7-dihydrocyclope

HPLC培训教程

曲线方程及定量参数（峰高h和峰面积A） 根据塔板理论，流出曲线可用下述正态分布方程来描述： C＝e　　或　　C＝e 由色谱流出曲线方程可知：当t＝tR时，浓度C有极大值，Cmax＝。Cmax就是色谱峰的峰高。因此上式说明：①当实验条件一定时（即σ一定），峰高h与组分的量C0（进样量）成正比，所以正常峰的峰高可用于定量分析。②当进样量一定时，σ越小（柱效越高），峰高越高，因此提高柱效能提高HPLC分析的灵敏度。 由流出曲线方程对V(0~∞) 求积分，即得出

【资源】HPLC培训教程

的面积。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064 Wh/2h 2．定性参数（保留值） 死时间(dead time，t0)——不保留组分的保留时间。即流动相（溶剂）通过色谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。 死体积(dead volume，V0)——由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被流动相占据，Vm）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程，其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰

DNA甲基化研究方法的回顾与评价（下）

of inter-methylated sites, AIMS）等，这些新技术的出现为甲基化胚胎发育、肿瘤细胞异常基因印记向更深层次的发展提供了有效方法学工具。简单说来,[46][47][48] 1.RLGS是将稀有切点限制酶（NotⅠ）和二维凝胶电泳相结合，与NotⅠ-Eco RV文库进行对比分析，检测、扫描全基因组甲基化的情况。它的缺点是只能分析基因组中50%左右的CpG岛；2.MSRF用到限制性内切酶，如：MseⅠ、BstUⅠ，并采用10碱基随机引物扩增差异甲基化片段，几乎可以检测全基因组所有CpG岛