(H-Pyrrol-1-ylaceticacid 1916

HPLC培训教程

为： N＝()2＝16()2＝5.54()2 N为常量时，W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上，如果各组分含量相当，则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽，峰高则逐渐降低。 用半峰宽计算理论塔数比用峰宽计算更为方便和常用，因为半峰宽更易准确测定，尤其是对稍有拖尾的峰。 N与柱长成正比，柱越长，N越大。用N表示柱效时应注明柱长，如果未注明，则表示柱长为1米时的理论塔板数。（一般HPLC柱的N在1000以上。） 若用调整保留时间(t'R)计算理论塔板数，所得值称为

HPLC法测定磁性微球及大鼠肝组织中的平阳霉素

，得200 μg.mL-1咖啡因溶液作为内标溶液。 　　取上述PYM标准溶液5 μL，内标溶液10 μL，加重蒸馏水定容至0.2 mL，取20 μL进样，得标准色谱图(图1-A)，PYM及内标的保留时间分别为2.91 min和4.14 min。取新鲜无药鼠肝组织，充分匀浆后离心取上清液0.1 mL，加入10%三氯醋酸0.1 mL，混匀，10 000 r.min-1高速离心10 min，取上清液20 μL进样，得空白色谱图(图1-B)。取新鲜含药鼠肝组织，充分匀浆后离心取上清液0.1 mL，加入内标

【资源】HPLC培训教程

的面积。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064 Wh/2h 2．定性参数（保留值） 死时间(dead time，t0)——不保留组分的保留时间。即流动相（溶剂）通过色谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。 死体积(dead volume，V0)——由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被流动相占据，Vm）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程，其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰