大肠杆菌噬菌体T7核酸参考品（热灭活）（强阳性）

分子克隆的常用工具酶（组图）

限制和修饰现象在上个世纪中期被人们所发现，到 2005年1月，已经发现4342 种限制酶和甲基化酶，其中限制酶有3681 种。限制性内切酶有特定的识别位点和切割位点，切割后可产生平末端或粘性末端。酶切有标准的反应体系，受末端长度的影响，有位点偏爱性，在极端非标准条件下会产生星星活性。通过酶切连接可以增减酶切位点，酶切位点在基因组中的分布是不均匀的。大肠杆菌有三种甲基化酶和三种依赖于甲基化的限制系统。甲基化对限制酶切影响。基因操作常用的 DNA 聚合酶有大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ，T4、T7

【建议】本月讨论与整理专帖-T-A克隆，另开帖不加分！

于质粒的纯化。 recA1 减少克隆DNA的非特异性重组。 DE3 编码T7 RNA聚合酶，用于诱导T7-启动的表达系统的表达。 DeoR 可以高效吸收大片段DNA，有利于文库的构建。 Tn10 含 有四环素抗性的转座子。 OmpT 表明大肠杆菌缺乏外膜蛋白酶。缺乏外膜蛋白酶的菌株可以降低表达的外源蛋白在细菌中被降解的程度，有利于获得完整的重组蛋白。 PLys 含编码T7溶菌酶的质粒；通过抑制T7 RNA聚合酶基础表达水平来降低T7启动的表达体系的基础表达水平。 ArgF 由于突变

核糖核酸酶Ⅲ ribonuclease Ⅲ

缩写为RNase Ⅲ。为切断 RNA双链的核酸内切酶，在大肠杆菌中发现。已知在其他生物中也有具有同样活性的核糖核酸酶。将 RNA双链切断（无一定部位），变成约有 15个核苷酸的片段。另外，此酶在 T7噬菌体从初级基因群转录产物产生数种 mRNA时，或从大肠杆菌核糖体 RNA（ rRNA）操纵子转录产物产生 rRNA或 tRNA时，它参与加工过程。此时，前体 RNA分子在特定部位被切断。在加工反应中，在切断部位的附近存在着部分双链结构，但切断部位则不一定形成双链结构。