E型肉毒毒素基因质粒定性标准样品

食品中肉毒杆菌检测

下厌氧培养 24 h。3. DNA 模板制备及浓度测定 取1.4 ml TPGY 培养物转移到 1.5 ml 离心管中，14000 r/min 离心 2 min，弃去上清液。沉淀使用商品化细菌基因组 DNA 提取试剂盒提取 DNA，按照试剂盒说明书进行操作。提取的 DNA 进行纯度和浓度测定后置于 -20 ℃ 保存。4. PCR 扩增 采用分别针对 A、B、E、F 型肉毒梭菌肉毒毒素基因设计的型特异性引物（见附表1），进行多个 PCR 扩增，每个 PCR 反应管检测一种类型的肉毒

腺相关病毒（AAV）技术快速入门

腺相关病毒（AAV）作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具，在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于 AAV 的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。   什么是 AAV？ 野生型 AAV 是一种复制缺陷型微小病毒，需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。而我们做实验用的是不需要辅助病毒的重组 AAV 病毒（rAAV）。将目的基因的 CDS 区序列或者 RNAi 干扰序列插入 rAAV 表达质粒中，包装

miRNA的靶基因的寻找与鉴定

型启动子（CMV、Ubi等）终止转录的情况。载体系统也分多种，包括慢病毒载体、腺病毒载体、质粒载体等。瞬时过表达方式主要是经过人工化学修饰的运用化学方法合成的双链RNA，能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达，以增强内源性miRNA的调控作用，进行功能获得性研究。只需直接转染进入细胞，即可检测功能变化，快速，方便。miRNA靶位点鉴定：目前最为常用的miRNA靶位点鉴定方法是荧光素酶报告基因法。其基本原理是首先构建荧光素酶表达载体，将希望鉴定的miRNA靶基因的3′UTR构建到荧光素酶基因