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现货
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广州市左克生物
- 规格:
10个/包
产品简介:
品牌:BNCC
货号:BNCC361023
产品名称:LB+50mcg/ml卡那霉素琼脂即用型平板
规格:10个/包
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
说明:1、细胞&菌种等产品规格有多种时,默认发第一种规格,不同规格价格不同,具体找客服联系; 2、北纳细胞&菌种货期可参考:冻存细胞现货当天可发出。复苏细胞需要7-15个工作日;菌种一般默认发冻干粉;其他如菌液或者平板等形式需要7-15个工作日。
订购须知:
6323)所有产品仅可用于科研目的的生物学实验(forresearchuseonly),严禁用于人体或动物的医疗目的
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文献和实验2.5×1010个细胞/ml)。分装,-80℃或液氮保存待用。 2、病毒骨架质粒转化大肠杆菌,扩增,纯化。 3、将1-5ul (约1ug) 线性化的穿梭质粒及1ul(约100ng/ul)病毒骨架质粒(如pAdEasy-1)加入至含约40ul BJ5183电转感受态的EP管中混匀,冰上冷却。 4、将混合物加入电转杯,电击(1250-1500V/mm,5ms)。 5、电击结束取出样品,加入1ml SOC或LB培养液,37℃低速振荡40min。 6、取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性平板
(约1µg) 线性化的穿梭质粒及1µl(约100ng/µl)病毒骨架质粒(如pAdEasy-1)加入至含约40µl BJ5183电转感受态的EP管中混匀,冰上冷却。 4 将混合物加入电转杯,电击(1250-1500V/mm,5ms)。 5 电击结束取出样品,加入1ml SOC或LB培养液,37℃低速振荡40min。 6 取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性平板(25-50mg/ml),37℃培养16-20hr。 7 次日挑取平板上长出的菌落(选择
5ml管中, 迅速置于37℃摇床,150rpm,培养1小时。 8)取菌液50~100μl涂布在含氨苄青霉素、IPTG和X-Gal的LB平板上,37℃培养过夜,筛选转化子。注意要设空白,及质粒DNA对照。 (3)克隆片段的检测-1 1)在LB平板上挑取白色单菌落,置于2ml含氨苄青霉素的LB液体培养基中,37℃、200rpm振荡培养12-16小时; 2)4℃、12,000rpm离心30秒,收集细胞沉淀; 3)碱裂解法提取并纯化质粒DNA; ①将细菌沉淀,菌体重悬于100µl用冰
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