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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见包装
- 保质期:
见包装
- 英文名:
Escherichia coli Stbl3(PLL3.7)
- 库存:
现货
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
冻干粉
产品简介:
品牌:BNCC
货号:BNCC359014
产品名称:Stbl3(含PLL3.7质粒)大肠杆菌
规格:冻干粉
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
说明:1、细胞&菌种等产品规格有多种时,默认发第一种规格,不同规格价格不同,具体找客服联系; 2、北纳细胞&菌种货期可参考:冻存细胞现货当天可发出。复苏细胞需要7-15个工作日;菌种一般默认发冻干粉;其他如菌液或者平板等形式需要7-15个工作日。
订购须知:
1)所有产品仅可用于科研目的的生物学实验(forresearchuseonly),严禁用于人体或动物的医疗目的
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文献和实验系列):高拷贝会导致大片段质粒复制压力大,易丢失或断裂,优先用低拷贝载体(如 pACYC184,拷贝数 10-15)或大片段专用载体(如 BAC 载体 pBeloBAC11,可容纳 100kb 以上片段,在大肠杆菌中稳定存在); ④选择合适的连接方法,比如 Gibson 组装(无缝克隆)的方法更适合 10-20kb 大片段的连接,相比传统的 T4 连接的方法,成功率更高,操作更简便; ⑤选择重组缺陷型感受态,提高大质粒的转化效率,如 Stbl3、DH10B 等,此外转化方式也会影响转化
短片段(5kb 以内)的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率,可以从以下几方面考虑: ①选择合适的克隆载体,例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体; ②选择合适的克隆方法,通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高; ③选择合适的纯化方式,纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用,并且注意两者的使用比例; ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞,例如 stbl3,JM109 等; ⑤挑选单克隆菌落时需要注意,成功重组大片段的阳性单克
苄青霉素及 140 g/mL X-gal。作为载体的质粒都含有一种或两种抗生素的耐药基因,当把这种质粒转入大肠杆菌后,此菌便获得了抵抗这种抗生素的能力。目前分子克隆所用的克隆载体多含氨苄青霉素耐药基因,所以涉及最多的是氨苄青霉素筛选。当将氨苄青霉素加入培养基中后,只有含质粒的细菌能够繁殖,而不含质粒的细菌则不能繁殖形成菌落。此种筛选不能鉴别重组质粒或自身环化的质粒。在用含氨苄青霉素耐药基因的质粒进行克隆时,转化平板培养基中要加入氨苄青霉素。(四)质粒和菌株的保存:1. 质粒可以在-20 ℃ 冰冻保存。2. 菌株
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