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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
2,4-Dichloro-5-methyl-5H-pyrrolo3,2-dpyrimidine
- 库存:
999
- 供应商:
智溯科ZSK
- CAS号:
129872-81-7
- 规格:
10mg///100mg///200mg
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文献和实验时你们一般用多少柱床体积?10X够了吗? 一般也就3-5个床体积吧,离子交换需要平衡体积大点也,10X足够了 101) 有个关于胰岛素精纯化的问题想向你请教,我已取得95%纯度样品。但杂质大于1%,进一步纯化,用什么柱子,具体操作又怎样做呢,谢谢赐教。 我知道,我好象回复过,你用反相硅胶10um的柱子1.0X25cm或者2.2X25cm的柱子做制备,这样可以达到99%以上的纯度,别的方法很难做到你需要的纯度,此外胰岛素也可以用等电点沉淀的办法去掉一些杂质。 HPLC制备你可以参考
沉淀,我用0.5%CHAPS助溶可勉强溶解部分,目的蛋白疏水性比较强。既然是疏水性很强你可以加点甘油或者乙二醇降低极性,这样溶解就会好得多,此外你也直接加2%的PEG这样也降低极性,同时保护你的蛋白,你再做纯化就可以了,我以前遇到这样的蛋白是用10%的乙醇加3-5%的PEG5000,这样的情况下蛋白还是活性回收率很高,我觉得那些表面活性剂能不用还是不用的好,你失去活性你可以监测一下提取,纯化,酶切到底哪里失去了活性,这样更容易解决你的问题。还有注意缓冲液PH值,看看改变它对溶解度有没有影响。蛋白
性。八、引物的一个重要参数是熔解温度(Tm)。这是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA 分子时的温度。两引物的Tm 值相差不应大于5℃。计算Tm 有几种公式。第一个公式(Wallace 规则):Tm = 4℃(g + C) +2℃(a + T),这来源于高盐溶液中的杂交,适用于小于15-20个碱基的引物,也适用于手工设计时的简单计算。第二个公式(Baldino 算法)适用于计算14-70个核苷酸在≤0.4mol\L 的阳离子溶液中的Tm, 也可用于扩增产物的Tm 计算。Tm=81.5+16
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