(4-Fluorophenyl)thieno3,2-dpyr

分子杂交技术  

×切口平移缓冲液 5μl 　　　　待标记的DNA 1μg 　　　　[α-32 P]dCTP或dATP(70μCi) 7μl 　　　　E.coli DNA聚合酶 4单位 　　　　DAN酶 I 1μl 　　　　加水至终体积 50μl 　　(2) 置于15℃水浴60分钟。 　　(3) 加入5μl EDTA终止反应。 　　(4) 反应液中加入醋酸铵,使终浓度为0.5mol/L, 加入两倍体积预冷无水乙醇沉淀回收DNA探针。 　　[注意] 1、3H，32P及35S标记

分子实验方法9:分子杂交技术

　　　　DAN酶 I 1μl 　　　　加水至终体积 50μl 　　(2) 置于15℃水浴60分钟。 　　(3) 加入5μl EDTA终止反应。 　　(4) 反应液中加入醋酸铵,使终浓度为0.5mol/L, 加入两倍体积预冷无水乙醇沉淀回收DNA探针。 　　[注意] 1、3H，32P及35S标记的dNTP都可使用于探针标记，但通常使用[α-32 P]-dNTP。 　　　　　2、DNA酶Ⅰ的活性不同，所得到的探针比活性也不同

分子生物学常用实验技术（page 3)

平移缓冲液5μl 待标记的DNA 1μg [α-32 P]dCTP 或dATP(70μCi) 7μl E.coli DNA 聚合酶4 单位 DAN 酶I 1μl 加水至终体积50μl (2) 置于15℃水浴60 分钟。 (3) 加入5μl EDTA 终止反应。 (4) 反应液中加入醋酸铵,使终浓度为0.5mol/L, 加入两倍体积预冷无水乙醇沉淀回收DNA探针。 [注意] 1、3H，32P 及35S 标记的dNTP 都可使用于探针标记，但通常使用[α-32 P