(Chloro-4'-fluoroacetophenone

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/2)――峰高一半处的峰宽。Wh/2＝2.355σ Ø标准偏差(standard deviation，σ)――正态分布曲线x＝±1时（拐点）的峰宽之半。正常峰的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。 Ø峰面积(peak area，A)――峰与峰底所包围的面积。A＝×σ×h＝2.507 σ h＝1.064 Wh/2 h 2．定性参数（保留值） Ø死时间

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的面积。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064 Wh/2h 2．定性参数（保留值） 死时间(dead time，t0)——不保留组分的保留时间。即流动相（溶剂）通过色谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。 死体积(dead volume，V0)——由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被流动相占据，Vm）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程，其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰

qPCR 实验中遇到这 3 个问题怎么办？

标准曲线绘制及扩增效率计算： 可以在 excel 上进行扩增效率的计算。稀释梯度可以设置为-1 /- 2/-3，每个梯度对应的 CT 值分别为 23.69 / 27.04 / 30.27，如下图，进行标准曲线绘制。通过标准曲线可以得到线性方程（y = -3.29 x + 20.42）与 R2 值（R2 = 0.9999）。将线性方程得到的斜率（-3.29）带入扩增效率计算公式中： 即可得到扩增效率。本基因使用 Vazyme #Q711 扩增效率为 101.35%。 只有当扩增效率满足 90