(Trisodiumhydrogenethylenediam

细胞上清液提取常见问题解析

蛋白可供选择？ 暂无。目前文献中报道有使用 Actin， GAPDH 作为内参蛋白。 16、进行外泌体鉴定检测时，需要准备多少的初始样品量？ 根据 Umibio 实验室的数据统计，进行不同的鉴定检测实验，建议准备相应剂量的初始样品量： 样品类型 电镜检测 NTA检测 Western Blot检测 肿瘤细胞上清液 ≥20 mL ≥20 mL ≥60 mL 原代细胞/干细胞/神经细胞上清液 ≥40 mL ≥40 mL ≥120 mL  

qPCR 实验中遇到这 3 个问题怎么办？

荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外，qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况： 1. 复孔间重复性差怎么办？ 复孔间重复性差一般会有以下两种情况： （1）CT 值很大，如 CT≥ 30，重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布，即在有效模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性，直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法：如果融解曲线没有杂峰，无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上，那 CT 值为准确的，可多设置

AAV 三保一是什么？shRNA 体内敲低一次保一条有效靶点

先说结论：RNAi 靶点的有效性天生不确定，尤其 AAV 体内实验成本高、难批量筛。吉凯基因的 AAV 三保一，是针对单基因设计 3 条独立 shRNA 靶点并行，承诺至少 1 条在 mRNA 水平敲减 ≥60%，用多靶点并行把"单靶点可能失效"的风险兜住——适合动物体内和难转染细胞的基因沉默。 本文面向需要做 AAV 介导 shRNA 敲低、担心靶点失效的科研人员。文中设计规则与判定标准来自吉凯三保一技术说明，具体项目以官方为准。 --- 为了少返工，先确认这几件事 目标组织与目标细胞