(Trisodiumhydrogenethylenediam

细胞上清液提取常见问题解析

蛋白可供选择？ 暂无。目前文献中报道有使用 Actin， GAPDH 作为内参蛋白。 16、进行外泌体鉴定检测时，需要准备多少的初始样品量？ 根据 Umibio 实验室的数据统计，进行不同的鉴定检测实验，建议准备相应剂量的初始样品量： 样品类型 电镜检测 NTA检测 Western Blot检测 肿瘤细胞上清液 ≥20 mL ≥20 mL ≥60 mL 原代细胞/干细胞/神经细胞上清液 ≥40 mL ≥40 mL ≥120 mL  

金开瑞生物超滤离心管（15 mL）全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换，一根搞定

损。 04 避坑要点 ▪沉淀必先去除：蛋白聚集体会不可逆堵膜，流速归零即报废；   ▪起始浓度≥ 1 mg/mL：过低会因膜吸附导致回收率骤降；浓缩倍数建议≤ 20×； ▪膜不可晾干：干燥后孔径改变、基本报废，暂不用须保湿 4 ℃ 存放； ▪非无菌产品：严禁高温高压灭菌、次氯-酸-钠消毒；表面消毒仅限 70% 乙醇短时处理； ▪高盐（> 500 mM）先稀释：缓冲液 pH 差 ≤ 1，防止蛋白沉淀； ▪一次性使用：科研发表、GMP/GLP 场景禁止复用，珍贵样本

qPCR 实验中遇到这 3 个问题怎么办？

荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外，qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况： 1. 复孔间重复性差怎么办？ 复孔间重复性差一般会有以下两种情况： （1）CT 值很大，如 CT≥ 30，重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布，即在有效模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性，直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法：如果融解曲线没有杂峰，无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上，那 CT 值为准确的，可多设置