(Chloro-1,1,2-trifluoroethylme

金开瑞生物超滤离心管（15 mL）全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换，一根搞定

损。 04 避坑要点 ▪沉淀必先去除：蛋白聚集体会不可逆堵膜，流速归零即报废；   ▪起始浓度≥ 1 mg/mL：过低会因膜吸附导致回收率骤降；浓缩倍数建议≤ 20×； ▪膜不可晾干：干燥后孔径改变、基本报废，暂不用须保湿 4 ℃ 存放； ▪非无菌产品：严禁高温高压灭菌、次氯-酸-钠消毒；表面消毒仅限 70% 乙醇短时处理； ▪高盐（> 500 mM）先稀释：缓冲液 pH 差 ≤ 1，防止蛋白沉淀； ▪一次性使用：科研发表、GMP/GLP 场景禁止复用，珍贵样本

AAV 质控怎么看？滴度、空壳率、内毒素三个指标决定动物实验成败

定量病毒基因组拷贝 体内常需 ≥1×10¹² vg/mL，以满足注射体积（以官方为准） 空壳率 没装基因的空衣壳占全部衣壳的比例 阴离子交换色谱、蔗糖密度梯度、透射电镜、AUC 等区分满壳与空壳 越低越好；研究级期望满壳比例尽量高，临床级要求更严（以官方为准） 纯度 杂蛋白、宿主细胞蛋白多不多 SDS-PAGE、HPLC、A260/A280 电泳可见三条衣壳条带清晰，杂带少 内毒素 细菌裂解残留的毒素 鲎试剂法（LAL）凝胶 / 动态浊度 体内常要求 <10 EU/mL，更严方案更低

Western Blot实验中转膜和封闭的注意事项

谁可小看“蛋白标准”(下) )就更方便了。 有人说在中性条件下电泳有助于蛋白测序，如果要蛋白测序需要提前一天倒胶，并说预电泳6小时(有还原剂如Glycolate)后再倒积层胶。除了要做HPLC分析应该用丽春红S而不要用考马斯亮蓝或者氨基黑染色，其他的比如测序和或者PTH都可以选灵敏度高些的考马斯亮蓝或者氨基黑。没条件做，参考而已。 转印后的PVDF膜在含20%甲醇溶液中在白透射光照下不用染色也依稀可以看到透明的蛋白条带，有时这种快速的方法可以不用染色识别条带，避免染色膜影响后继