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HPLC入门问题FAQ

段质量。 11.怎样在质谱的图谱上确定单一同位素峰和平均同位素峰? 在分辨率低的质谱图谱上，所显示的峰一般是平均同位素峰。但目前常用的质谱方法（比如 MALDI-TOF ）分辨率一般都很高，一般的小分子（比如肽段）常含有 4 到 5 个同位素峰，其中分子量最小的那个就是单一同位素峰。但是，当用质谱检测大分子（比如完整蛋白质）时，同位素峰的数目很多，难以在图谱上区分。在这种情况下，使用平均同位素质量会比较更有意义。 12.同位素峰之间一定是相差 1 Da 吗？ 同位素肽段的质量（m

HPLC培训教程

： 高压――压力可达150~300 Kg/cm2。色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。 高速――流速为0.1~10.0 ml/min。 高效――可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度――紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相色谱相比有以下优点： 速度快――通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。 分辨率高――可选择固定相和流动相以达到最佳分离

HPLC的固定相和流动相

，结果减少传质，最终使柱效降低。 　　1．基质的种类 　　1）硅胶 硅胶是HPLC填料中最普遍的基质。除具有高强度外，还提供一个表面，可以通过成熟的硅烷化技术键合上各种配基，制成反相、离子交换、疏水作用、亲水作用或分子排阻色谱用填料。硅胶基质填料适用于广泛的极性和非极性溶剂。缺点是在碱性水溶性流动相中不稳定。通常，硅胶基质的填料推荐的常规分析pH范围为2~8。 　　硅胶的主要性能参数有： ①平均粒度及其分布。 ②平均孔径及其分布。与比表面积成反比。 ③比表面积。在液固吸附