1H,1H,5H-八氟戊基-1,1,2,2-四氟乙基醚，AB

BA-Spot-ELISA法检测抗体形成细胞

至1000ml（3）封闭液（1%BSA pH9.6 碳酸盐缓冲液）（4）抗原（5）BiO-Ab和Avi-HRP [操作方法] （1）培养板的预处理：在24培养板孔内加0.5ml 0.2%戊二醛（溶于0.1mol/L，pH5.0 PB），37℃，4h，甩去板中的处理液，PBS洗涤3次，每次3min； （2）抗原包被：将适量抗原溶于包被缓冲液中，每孔加入0.5ml，4℃过夜，PBS-T洗涤3次，每次3min； （3）制备细胞悬液：将待测已致敏小鼠处死，取出脾脏，置于加有

单克隆抗体的制备过程

g离心20min，可见辛酸因温度低而从系统中结晶析出漂浮在腹水上层，弃去此结晶以及底部沉淀，向上清中加入1/10体积的10×PBS（0.1M，pH 7.4),4 ℃条件下向其中加入硫酸铵固体至终浓度为0.277 g/ml，静置1h以上; （3）10000 g离心20min；弃上清，将沉淀溶于适量PBS中，再将其装入透析袋对PBS透析（透析液应为抗体体积的100倍以上，最好搅拌），4 ℃过夜； （4）收集透析好的抗体，直接现用或加入保护剂和防腐剂长期保存。保存条件同多抗保存

　原位杂交免疫细胞化学技术的未来与展望

mm的孔）的凹孔内，加热105℃90s，然后以2%多聚甲醛-磷酸缓冲液，pH7.4，固定1h，PBS漂洗3min×3。如用生物素标记核酸探针，应用0.3%的H 2 O 2 孵育37℃过夜，然后以蛋白酶K溶液（5μg/ml PBS）55℃孵育2h（孵育时间应根据细胞的种类而定），将孵育的载片置于96℃热板上2min，最终以蒸馏水漂洗，空气干燥。在溶液中按PCR技术的需要加入20PM一对应的引物（Primer），15μg PCR混合液含10μmol/l dATP