六溴碲(IV)酸钾，AB66723-1g

蛋白质含量测定法 哪个学校的讲义？

，误差为 2％  费时 8～10小时  将蛋白氮转化为氨，用酸吸收后滴定  非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离）  用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少；费时太长 双缩脲法（Biuret法）  灵敏度低 1～20mg  中速 20~30分钟  多肽键＋碱性Cu2＋紫色络合物  硫酸铵； Tris缓冲液； 某些氨基酸  用于快速测定，但不太灵敏；不同蛋白质显色相似 紫外吸收法  较为灵敏 50～100g  快速 5～10分钟  蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处

6种方法测定蛋白质含量

法。 此法的缺点是： （1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。 （2）仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、triton x-100、十二烷基硫酸钠（sds）和0.1n的NaOH。（如同0.1n的酸干扰lowary法一样）。 （3）标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用beer定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。 （二）试剂

蛋白质含量测定法

小时，回流结束时，加入150克硫酸锂(Li2SO4)，50毫升蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴。冷却后溶液呈黄色(如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的步骤)。稀释至1升，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存。使用时用标准NaOH滴定，酚酞作指示剂，然后适当稀释，约加水1倍，使最终的酸浓度为1N左右。 (3)标准蛋白质溶液: 精确称取结晶牛血清清蛋白或g—球蛋白，溶于蒸馏水，浓度为250 mg/ml左右。牛血清清蛋白溶于水若混浊，可改用0.9 % NaCl溶液。 2.器材