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2-8℃
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99
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联硕生物
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500ml
纯度:1×,pH7.4
保存温度:2-8℃
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文献和实验加入适量红细胞裂解液裂解红细胞(可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解 2 min 后,立马加入 10 mL PBS,300 g 离心 5 min 后弃上清)。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养,请注意无菌操作。 收集腹水时,从小鼠左侧(肠道较多)注射 PBS,从右侧(器脏较大)抽腹腔灌洗液,注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱,加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存,但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞,巨噬细胞检测需要封闭Fc受体,此时可使用小鼠 CD16/32纯
振荡器混匀,磁珠用量根据所需取用,置于EP管中,加入偶联液,使磁珠的终浓度为5mg/mL,使用旋涡振荡器混匀,后置于磁性分离架上,富集磁珠,去除上清,后再加入偶联液重复清洗一次。 2.3. 计算所需SA的体积,先加入偶联液,旋涡震荡混匀,再加入EDC和NHS,最后加入SA,然后继续旋涡混匀,后置于37℃环境旋转混匀反应2h。EDC与NHS的比例为1:1,此偶联反应中,EDC和NHS的终浓度都是1.5mg/ml,SA与磁珠的比例为1:25,磁珠的终浓度亦为5mg/mL。 2.4. 偶联反应完成
(SATC) 1:100 Caltag SA1006 Procedure: Collect 200 - 500 uL blood from each mouse. Mix with 50 uL 0.5M EDTA in 1.5 mL eppendorf tubes. Add 250 uL blood to 5 mL RBC Lysis Buffer (20x vol
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